抗肿瘤活性茯苓多糖的提取纯化与结构分析-天津中草药杂志社.PDF

• 2146 • 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 11 期 2012 年 11 月 抗肿瘤活性茯苓多糖的提取、纯化与结构分析 黄 灿，王玉明，赵 骏* 天津中医药大学中药学院，天津 300193 摘 要：目的 对具有抗肿瘤活性的茯苓多糖进行提取、纯化以及结构分析。方法 采用水提醇沉法提取茯苓多糖，三氯乙 酸法除蛋白，凝胶色谱柱纯化得到抗肿瘤活性茯苓多糖 ATPCP ，高效液相凝胶色谱法测其相对分子质量，样品水解后经过 13 1 TLC 及 GC-MS 分析确定单糖组成，通过 FT-IR 、 C-NMR 和 H-NMR 对其进行结构分析。结果 GPC 结果显示抗肿瘤活性 茯苓多糖的重均相对分子质量为 16 850，多分散性为 1.34，TLC 及 GC-MS 结果显示其含有岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、甘露 糖，各单糖的物质的量比为 1 ∶2.36 ∶5.49 ∶2.34 。FT-IR 和 NMR 结果显示 ATPCP 含有 α-型和 β-型吡喃糖，其主链为 1, 6- 糖苷键，并存在 1, 4-糖苷键支链。结论 茯苓中具有抗肿瘤活性的茯苓多糖是由 4 种确定的单糖组成并伴有支链的杂多糖。 关键词：茯苓多糖；抗肿瘤；组分分析；核磁共振；红外光谱分析 中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)11 - 2146 - 04 Preparation, purification, and analysis of chemical composition of anti-tumor polysaccharide from Poria cocos HUANG Can, WANG Yu-ming, ZHAO Jun Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China Key words: polysaccharides of Poria cocos (Fr.) Wolf.; anti-tumor; component analysis; NMR; FT-IR 自从发现茯苓Poria cocos (Fr.) Wolf. 多糖的抗 限公司）、UV—2401PC 紫外可见分光仪（日本岛 肿瘤活性以来，对其活性研究一直是多糖抗肿瘤活 津）、智能型傅里叶变换红外光谱仪（Nicolet 公司）、 性研究的热点之一。研究发现多糖的形态结构，相 Brucker—Plus 400 核磁共振波谱仪（瑞士 Brucker 公 对分子质量以及化学成分组成均会影响多糖的抗肿 司）、GC MS—QP2010SE 气相色谱质谱联用仪（日 [1] [2] 瘤活性 。Ke 等 以热水为溶剂提取出茯苓多糖， 本岛津）、Waters 高效液相色谱仪，Shodex SB-804 HQ 分析由核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和 （300 mm ×8 mm，10 μm ）（北京京京时代科技发展 半乳糖组成，通过小鼠体内抗肿瘤实验证明其能够 有限公司），右旋糖苷 Dextran （Fluca ）依次为（重 明显抑制肿瘤细胞的生长，并能增加小鼠体内的 均相对分子质量约值）1 000、5 000、12 000、25 000 、 SOD、CAT 和 GPX 的活性。目前，鲜有文献报道茯 50 000、80 00、150 000、410 000 、670 000 （北京 苓多糖相对分子质量对茯苓多糖抗肿瘤活性的影 拜尔迪生物有限公司），葡萄糖、半乳糖、木糖、果 响。本实验为了探究茯苓多糖相对分子质量、结构 糖、鼠李糖、树胶醛糖（均为分析纯，天津市博迪 与茯苓多糖抗肿瘤活性之间的关系，分离得到不同 化工有限公司），岩藻糖对照品（100