子宫兴奋药对离体大鼠子宫平滑肌的作用
【目的】
本实验利用成年未孕的大鼠子宫,观察不同剂量的缩宫素对子宫的兴奋作用。
【原理】
缩宫素又名催产素,对子宫平滑肌有选择性兴奋作用,是临床常用的子宫兴奋药。小剂量缩宫素可促进子宫底部节律性收缩,增加子宫收缩力量和收缩频率,其收缩性质与自然分娩类似;大剂量则引起子宫强直性收缩。子宫平滑肌对缩宫素的敏感性与体内雌激素有密切关系。雌激素可提高其敏感性。
【预习要求】
1.仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统(或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统)。
2.实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类;第四章第一节 动物实验的基本操作;统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法。阅读药理学教材中子宫兴奋药的相关内容,检索全文数据库中的有关的研究论文。
3.预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。
【材料】
160~240g雌性大白鼠;张力换能器,微机生物信号采集处理系统;20ml麦氏浴槽,20~200u1加样器,1ml加样器,0.01U/ml、0.1U/ml、1U/ml、10U/ml缩宫素,乐氏液,95%O2+5%CO2混合气体。
【方法】
1.实验系统连接和仪器参数设置
(1) 按图1连接装置。将张力换能器固定于微距调节器上,换能器输出线接微机生物信号处理系统一输入通道。麦氏浴槽中充以乐氏液至固定水平面,调节超级恒温器的温度至32℃,保证麦氏浴槽内恒温于32±0.5℃。通气管接95%O2+5%CO2气瓶管道。调节通气管气流,通气速度以麦氏浴槽中的气泡一个个逸出为宜。
(2)仪器参数设置
PcLab或MedLab系统仪器参数:张力换能器输入通道信号名称为张力,放大倍数200~500、直流耦合(下限频率DC)、上限频率10Hz,采样间隔5ms。
2.标本制备
(1)取160~240g健康雌性大白鼠,实验前24小时腹腔注射1g/L雌二醇0.2ml。
(2)用击打法或脊椎脱臼法处死大白鼠,剖腹找出子宫(呈“V”字型,图2),取出子宫,立即置于盛有4℃乐氏液的培养皿中,培养皿内放少许棉花,将子宫平放在浸湿的棉花上,仔细剥离附着于子宫壁上的结缔组织和脂肪(图3),然后将子宫的两角在其相连处剪开,取下一条子宫角约1.5~2cm,两端分别用线结扎。
图1
图2
图3
(3)移入麦氏浴槽,两结扎线一端固定于固定钩上,另一端与张力换能器相连。
(4)前负荷1g,稳定15~30min,待收缩张力和频率规则后,记录正常数据。
【观察项目】
1.0.01U/ml缩宫素,按0.02ml、0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液,观察对子宫的收缩作用,记录子宫收缩产生的最大收缩张力和最大频率。每次加入缩宫素须待反应稳定后再加药;
2.0.1U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液;
3.1U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液;
4.10U/ml缩宫素,按0.04ml、0.14ml容量顺序加入灌流液。
【注意事项】
1.把子宫一角取出及固定于灌流装置时不要损伤或过度牵拉子宫。
2.通气时要控制好速度,以免气泡太大,太急,冲击子宫而影响实验。
3.给药前应描计一段基础曲线,以便与用药后对照。
4.严格按照上述给药顺序给药。
【实验报告要求】
1.题目。
2.署名 作者和合作者姓名及单位。
3.结构式摘要(目的,方法,结果,结论)。
4.材料和方法 主要实验材料,标本制备方法,仪器装置连接和仪器参数,实验数据记录条件,观察指标。
5.结果 实验结果的文字性描述,作量效曲线。
6.讨论 回答思考题。
【思考题】
缩宫素对子宫作用及临床应用。
为什么实验前用雌二醇处理动物?
缩宫素与麦角新碱对子宫平滑肌的作用特点有何不同?
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