RT-PCR实验报告课件.docVIP

逆转录 pcr rt-pcr 为反转录 rcr （reverse transcription pcr ）和实时 pcr （real time pcr ）共同的缩写。逆转录 pcr ，或者称反转录 pcr(reverse transcription-pcr, rt-pcr) ，是聚合酶链式反应 (pcr) 的一种广泛应用的变形。在 rt-pcr 中，一条 rna 链被逆转录成为互补 dna，再以此为模板通过 pcr 进行 dna 扩增。 由一条 rna 单链转录为互补 dna(cdna) 称作“逆转录” ，由依赖 rna 的 dna 聚合酶（逆转 录酶）来完成。随后， dna 的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖 rna 的 dna 聚合酶完成， 随每个循环倍增，即通常的 pcr 。原先的 rna 模板被 rna 酶 h 降解，留下互补 dna。 rt-pcr 的指数扩增是一种很灵敏的技术， 可以检测很低拷贝数的 rna 。rt-pcr 广泛应用 于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种 rna 的含量。（检测基因表达的方法，参见 northern blot 法。） rt-pcr 有时候也会指代实时 pcr(real-time pcr) 。为了与逆转录 pcr 相区别， 通常被写 作“定量 pcr ”(quantitative pcr) 或者 rtq-pcr(real-time qua