蛋白酶激活受体—2与抑癌基因P53、人表皮生长因子受体—2在乳腺癌组织中的表达及其意义.docVIP

PAGE PAGE 1 蛋白酶激活受体—2与抑癌基因P53、人表皮生长因子受体—2在乳腺癌组织中的表达及其意义 　　[摘要]　目的　探讨蛋白酶激活受体-2（PAR-2）、抑癌基因P53和人表皮生长因子受体-2（HER-2）在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其与临床病理组织学指标的关联。　方法　应用组织芯片和免疫组化法检测76例乳腺浸润性导管癌组织中蛋白的表达，采用χ2检验或Fisher精确概率法分析蛋白表达的关系。　结果　76例癌组织中PAR-2阳性率为84.2%，P53为43.4%，HER-2为55.3%。PAR-2的表达与年龄、临床分期、肿瘤直径、组织学分级均无关，差异无统计学意义（P　＞　0.05），与淋巴结转移有关，差异有统计学意义（P　=　0.022）。HER-2的表达与年龄、临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移无关，差异无统计学意义（P　＞　0.05），与组织学分级有关，差异有统计学意义（P　=　0.034）。P53的表达与年龄、肿瘤直径、组织学分级、淋巴结转移无关，差异无统计学意义（P　＞　0.05），与临床分期有关，差异有统计学意义（P　=　0.03）。PAR-2与P53联合或与HER-2联合的阳性表达均与组织学分级有关，差异均有统计学意义（P　　0.05）。PAR-2与HER-2表达有关，差异有统计学意义（P　=　0.001）。　结论　PAR-2，P53，HER-2蛋白的异常表达可能涉及乳腺浸润性导管癌的发生和发展。 　　[关键词]　蛋白酶激活受体-2；P53；人表皮生长因子受体-2；表达；乳腺浸润性导管癌 　　[中图分类号]　R737.9[文献标识码]　A[文章编号]　1673-7210（2012）12（b）-0025-04 　　乳腺浸润性导管癌（IDC），是一种常见、多发、严重威胁女性健康的恶性肿瘤。近年来发病率有明显的上升趋势，肿瘤的发生、发展是多因素、多步骤的复杂过程，在其发生、发展过程中伴随多种基因和蛋白的改变。相关研究表明，ER、PR、HER-2等生物分子标志物在乳腺癌的发生发展中发挥作用，对判断肿瘤的预后及指导内分泌治疗有重要的临床意义[1]。通过对生物标志物的研究，可以更深入地认识乳腺癌的生物学行为。 　　PAR-2属于PAR家族，为典型的七次跨膜G蛋白耦联受体。PAR-2是胰酶受体，可被体内多种内源性激活剂激活[2]。PAR-2在胃肠道、胰腺、肾脏、肝脏、前列腺等器官广泛表达[3]，同时在多种恶性癌症中[4-5]高表达。近年来的研究提示，PAR-2与肿瘤细胞的侵袭、转移关系密切。 　　P53基因是抑癌基因，分为野生型和突变型，野生型P53的半衰期很短，浓度很低，难以测出。突变型P53蛋白则半衰期延长，浓度增加，可用免疫组织化学方法测出。因此，一般测出的P53是突变型，P53阳性者预后较差。有50%的肿瘤带有P53基因突变，P53突变是乳腺癌发生的早期信号，并贯穿于乳腺癌的发展演变过程。 　　原癌基因HER-2也称为CerBb-2或Her-2/neu，是人类表皮生长因子受体（EGFR）家族的第2个成员。HER-2过表达会激活癌基因，促进肿瘤发生。HER-2通过与不同的EGFR配体作用后，表达水平及其活性发生变化，增加了肿瘤细胞的浸润和转移。目前HER-2已被公认为是与乳腺癌发生发展密切相关的原癌基因。 　　笔者采用组织芯片的免疫组化染色法检测PAR-2、P53、HER-2在乳腺癌组织的表达，并分析它们与临床资料的关系，探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用。 　　1　材料与方法 　　1.1　材料 　　组织芯片（Od-CT-RpBre01）购自上海生物芯片公司。芯片具有76例乳腺浸润性导管癌患者的手术组织样本。所有乳腺癌病例均经HE染色病理检查确诊，患者均为女性，年龄31～80岁，中位年龄55岁。所有病例术前未接受化疗和放疗。 　　PAR-2鼠抗人单克隆抗体（SAM-11），Santa　Cruz公司；P53鼠抗人多克隆抗体（E-5），Santa　Cruz公司；HER-2兔抗人单克隆抗体（2242），Cell　Signaling　Technology公司；免疫组化试剂盒，DAKO公司。 　　1.2　方法 　　1.2.1　免疫组化方法采用免疫组织化学抗原热修复技术检测各蛋白表达。严格按照试剂盒操作说明进行，DAB显色。用枸橼酸高温高压法进行抗原修复。 　　1.2.2　免疫组化结果判断染色结果判定参照Fromowitz等[6]的评分标准，无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；阳性范围＜　5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞　75%为4分；以上两项结果相加，分值≥　2分判定免疫组化染色为阳性（+）。 　　1.3　统计学方法 　　采用统计软件SPSS