一、色谱法概述 色谱法是一种分离技术 色谱法原理 是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分配、吸附等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组份在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。 两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一相是流动的,成为流动相。 高效液相色谱与气相色谱比较 液相色谱仪 高效液相色谱分析过程 分析前,选择适当的色谱柱和流动相。开泵,冲洗柱子,待柱子达到平衡而且基线平直后,用微量注射器把样品注入进样口,流动相把试样带入色谱柱进行分离,分离后的组分依次流入检测器的流通池,最后和洗脱液一起排入流出物收集器。当有样品组分流过流通池时,检测器把组分浓度转变成电信号,经过放大输入计算机,经过工作站数据处理,就得到色谱图。色谱图是定性、定量和评价柱效高低的依据。 二、主要部件 (2) 进样装置 (3) 高效分离柱 (4)检测器 ⑷缺点 ①只能检测有紫外吸收的样品; ②检测波长>流动相的截止波长。 ⑸波长选择 ①选择λmax作检测波长,以得到较高的灵敏度; ②检测波长>流动相的截止波长。 ⑹紫外检测器的类型 ①固定波长型(已淘汰); ②可变波长型(最常用); ③二极管阵列检测器(最新型)。 b. 光电二极管阵列检测器 二极管阵列检测器(diode-array detector,DAD)以光电二极管阵列作为检测元件的紫外检
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