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REPORT S
ISSR
纪德华, 谢潮添, 陈昌生, 徐 燕, 张 元, 刘 冰
( , 36102 1)
: 为了利用ISSR 分子标记技术对坛紫菜(P orp hy r a ha itanensis ) 种质资源进行遗传分析及种质鉴定, 获
得清晰稳定 复性好多态性高的扩增结果, 对影响 ISSRP CR 扩增的多 个因素, 包括 DNA 模板含量
M g2+ 浓度Taq DNA 聚合酶含量引物浓度dNT P 浓度以及复性温度进行了全面比较和优化, 建立了坛紫
菜种质资源ISSRP CR 扩增的最佳反应体系: 25 L 的反应体系中含 2. 5 L 10 PCR 缓冲液, 5 ng 模板
DNA , 2. 5 mm l/ L Mg2+ , 1. 5 U Taq DNA 聚合酶, 200 nm l/ L 引物, 200 m l/ L dNTP 最佳 PCR 扩增程
序: 94 预变性7 min; 每 个循环94 变性1 min, 48 复性45 s, 72 延伸2 min, 共进行35 个循环; 循环结束
后72 再延伸7 min
: 坛紫菜( P orp hy r a ha itanensis ) ; ISSR; 实验条件; 优化
: S 917. 3 : A : 2008)
( P orp hy r a ha it anens is ) ,
, , DNAdNT PTaqaseM g2+
, 80% , ISSR
, ,
, ISSR
, , ,
ISSR ,
, DNA
, ,
, 1 材料与方法
[ 1] [ 2~ 4]
,
1. 1 材料
,
,
, ,
, 20 , 1 000~ 1 500 lx , 12
h ! 12 h
ISSR( intersim DN A
[ 5]
ple sequence repeat) Zietkiew icz SSR , PCR
,
DNA , ,
, , , RAPD
, , : :
: ( 2004NZ03) ;
[ 6] ( 3502 ;
, ISSR
: ( 1976) , , , ,
, ISSR
, : 05926182643, Email: dhji@ jmu. edu. cn; ,
[ 7, 8]
, , , : 0592
ISSR , PCR 6182643, Email: cschen @ jmu. edu. cn
20 / 2008 / 32 / 6
REPORTS
ISSR
1. 2 实验方法
1. 2. 1 DNA
, 0. 5 g ,
[ 9]
CTAB DNA
, 1. 0%
DN
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