流式细胞仪分析技术与应用.docxVIP

WORD格式-专业学习资料-可编辑 --学习资料分享---- 第十七章 c 流式细胞术（ flow cytometry ，FCM）是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。流式细胞仪的发展综合了激光技术、计算机技术、显微荧光 光度测定技术、流体喷射技术、分子生物学和免疫学等多门学科的知识。 第一节 概述 流式细胞仪由液流系统、光学与信号转换测试系统和信号处理及放大的计算机系统三大基本结构组成，可对细胞悬液中的单个细胞或特定细胞或其超微结构进行多参数快速分析，带分选系统的流式细胞仪还可按实验设计要求分选出具相同特征的同类型细胞，用于培养或进一步研究。流式细胞术所具有的分析和分选功能主要涉及光学原理、光电转换原理和测试原理三部分。 一、工作原理 采用激光作为激发光源 ，保证其具有更好的单色性与激发效率； 利用荧光染料与单克隆抗体技术结合 的标记技术， 保证检测的灵敏度和特异性；用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号 进行数据处理分析，保证了检测速度与统计分析的精确性。 散射光的测定 散射光信号的产生是细胞在液柱中与激光束相交时向周围 360°立体角方向散射的光线信号， 散射光的 强弱与细胞的大小、形状、光学同性、胞内颗粒折射有关，与接收散射光的方向也有关。流式细胞仪中涉及的散射光信号分为前向散射光（ FS）和侧向