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水中生化需氧量檢測方法
中華民國100年1月27日環署檢字第1000009050號公告
自中華民國100年5月15日起生效
NIEA W510.55B
一、方法概要
水樣在 20℃恆溫培養箱中暗處培養 5 天後,測定水樣中好氧性微生物在此期間氧化水中物質所消耗之溶氧(Dissolved oxygen,簡稱DO),即可求得 5 天之生化需氧量(Biochemical oxygen demand,簡稱 BOD5)。
二、適用範圍
本方法適用於地面水體、地下水、放流水及廢(污)水中生化需氧量檢測。
三、干擾
(一)酸性或鹼性之水樣會造成誤差,應使用氫氧化鈉或硫酸調整之。
(二)水樣中若含餘氯會造成誤差,可以使用亞硫酸鈉排除干擾。
(三)水樣中若含氰離子、六價鉻離子、重金屬及其他毒性化學物質均會造成干擾,必須經過適當處理,否則不適宜生化需氧量之測定。
(四)水樣中溶氧若過飽和會造成誤差。可將水溫調整至 20 ± 3℃,再通入空氣或充分搖動以去除干擾。
(五)水樣中無機物質如硫化物及亞鐵離子之氧化作用會消耗溶氧而造成誤差;此外,水樣中還原態氮之氧化作用亦會消耗溶氧而造成誤差,可使用硝化抑制劑以避免氧化作用。
(六)水樣中若含肉眼可見之生物,應去除之。
四、設備及材料
(一)BOD 瓶:60 mL 或更大容量之玻璃瓶(以 300 mL 具玻璃塞及喇叭狀口之 BOD 瓶為佳)。使用前應以清潔劑洗淨,然後以試劑水淋洗乾淨並晾乾。
(二)恆溫培養箱:溫度可控制在 20 ± 1℃,並可避光以預防 BOD 瓶中藻類行光合作用而導致水樣溶氧增加。
(三)高壓滅菌釜:溫度能保持在 121℃(壓力約 15 lb/in2 或 1.1 kg/cm2)滅菌 15 分鐘以上。
(四)溶氧測定裝置:參照水中溶氧檢測方法─碘定量法(NIEA W422)或水中溶氧檢測方法─電極法(NIEA W455)。
五、試劑
所有配製使用的試劑化合物除非另有說明,否則必須是分析試藥級;以下所述溶液中,若有沈澱或生物滋長跡象時即應捨棄。
(一)試劑水:比電阻 ≧ 16 MΩ- cm 之純水。
(二)磷酸鹽緩衝溶液:溶解 8.5 g 磷酸二氫鉀(KH2PO4)、21.75 g 磷酸氫二鉀(K2HPO4)、33.4 g 磷酸氫二鈉(Na2HPO4.7H2O)及 1.7 g 氯化銨(NH4Cl)於約 500 mL 試劑水中,再以試劑水稀釋至 1 L,此溶液 pH 值應為 7.2,無需任何調整。或者,溶解 42.5 g 磷酸二氫鉀(KH2PO4)及 1.7 g 氯化銨(NH4Cl)於約 700 mL 試劑水中,以 10 M 氫氧化鈉溶液調整 pH 值至 7.2,再以試劑水稀釋至 1 L。
(三)硫酸鎂溶液:溶解 22.5 g 硫酸鎂(MgSO4.7H2O)於試劑水中,並稀釋至 1 L。
(四)氯化鈣溶液:溶解 27.5 g 氯化鈣(CaCl2)於試劑水中,並稀釋至 1 L。
(五)氯化鐵溶液:溶解 0.25 g 氯化鐵(FeCl3.6H2O)於試劑水中,並稀釋至 1 L。
(六)硫酸溶液,0.5 M:緩緩加 28 mL 濃硫酸於攪拌之試劑水中,並稀釋至 1 L(註1)。
(七)氫氧化鈉溶液,1 M:溶解 40 g 氫氧化鈉於試劑水中,並稀釋至 1 L。
(八)氫氧化鈉溶液,10 M:溶解 40 g 氫氧化鈉於試劑水中,並稀釋至 100 mL。
(九)亞硫酸鈉溶液,0.0125 M:溶解 1.575 g 亞硫酸鈉(Na2SO3)於 1 L 試劑水中。此溶液不穩定,須於使用當日配製。
(十)硝化抑制劑:使用 2-氯-6-(三氯甲基)砒啶(2-Chloro-6-(trichloromethyl) pyridine,簡稱 TCMP)或 TCMP 市售品。
(十一)葡萄糖─麩胺酸溶液:葡萄糖(Glucose)及麩胺酸(Glutamic acid)經 103 ± 2℃ 烘乾至少 1 小時後,溶解 0.1500 g 葡萄糖及 0.1500 g 麩胺酸於試劑水中,並稀釋至 1 L。此溶液滅菌(過濾滅菌或 121℃ 高溫高壓滅菌 15 分鐘)後貯存於 4 ± 2℃ 下,可保存 3 個月,若溶液無法維持在無菌狀態,應於使用前配製。
(十二)碘化鉀溶液:溶解 10 g 碘化鉀於 100 mL 試劑水中。
(十三)源水:水樣稀釋用,可使用去離子水、蒸餾水、經去氯後之自來水或天然水。
六、採樣及保存
水樣在採集後迄分析之保存期間內,可能會因微生物分解有機物質而降低 BOD 值。水樣若在採樣後 2 小時內開始分析,可不需冷藏,若採樣後無法在 2 小時內開始分析,則水樣應冷藏於 4 ± 2℃ 暗處,並儘可能在 6 小時內分析,但無論如何,水樣應於採樣後 48 小時內進行
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