内膜系统(Gc、ly、Ps)、蛋白质的分选.ppt

高尔基体 最早发现于1855年，1898年，Golgi用银染法，在猫头鹰的神经细胞内观察到了清晰的结构，因此定名为高尔基体。20世纪50年代以后才正确认识它的存在和结构。 一、形态与结构 是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。 常分布于内质网与细胞膜之间，呈弓形或半球形。 凸出的一面对着内质网称为形成面或顺面（cis face）。凹进的一面对着质膜称为成熟面或反面（trans face）。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡。 扁平囊直径约1um，单层膜构成，中间为囊腔，周缘多呈泡状，3~8个扁平囊在一起(某些藻类可达一二十个)，构成高尔基体的主体(Golgi stack)。 The Golgi Apparatus 高尔基体(Golgi complex, GC) 高尔基体膜含有大约60%的蛋白和40%的脂类，具有一些和ER共同的蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间，中性脂类主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。 高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。 标志酶为糖基转移酶。 二、化学组成及酶类 三、高尔基复合体的极性 1、高尔基体顺面的网络结构（cis Golgi network，CGN），是高尔基体的入口区域。 2、高尔基体中间膜囊（medial Golgi），多数糖基修饰，糖脂的形成以及与高尔基体有关的糖合成均发生此处。 3、高尔基体反面的网络结构（trans Golgi network，TGN）， 是高尔基体的出口区域，功能是参与蛋白质的分类与包装，最后输出。 顺面GC网 中层囊 反面囊 反面GC网 大泡（分泌颗粒） 粗面内质网 高尔基复合体 顺面囊 中间高尔基网 蛋白质合成 溶酶体寡糖磷酸化 切除甘露糖 加N-乙酰葡萄糖胺 加半乳糖 加唾液酸；分拣 溶酶体 顺面高尔基网 中间囊 反面囊 反面高尔基网 大泡（分泌颗粒） rER 高尔基复合体 顺面囊 高尔基垛 (磷酸转移酶) 高尔基复合体不同的生化区室含有不同的酶，对蛋白质寡糖链按顺序依次修饰。这种顺序加工有利于糖蛋白的分选 。 ◎顺面膜囊（forming face, cis Golgi） 接受内质网新合成的物质，分类后转入中间膜囊， 小部分返回（驻留蛋白）；丝氨酸O-连接的糖基化， 跨膜蛋白胞质侧的酰基化 ◎中间膜囊（medial Golgi） 多数糖基化修饰，多糖合成 ◎反面膜囊（trans Golgi，网状结构） 管网状，连接囊泡；参与蛋白质的分类与包装， 最后输出；囊泡运输 四、主要功能 （一）蛋白质的运输与分泌 RER上合成蛋白质→进入ER腔→COP-II运输泡→进入CGN→在medial Gdgi中加工→在TGN形成运输泡→运输与质膜融合、排出。 3H标记亮氨酸 3分钟 20分钟 120分钟 高尔基复合体在细胞分泌活动中起着重要的运输作用；在分泌颗粒的形成过程中起着浓缩、修饰、加工等作用。 参与细胞的分泌活动 （二）蛋白质的加工 1、蛋白质的糖基化 O-连接的糖基化在高尔基体中进行，糖的供体为核苷糖。 2、对蛋白质的水解修饰 3、溶酶体酶的磷酸化 对蛋白质糖基化修饰 参与糖蛋白的合成和修饰 N-连接的糖蛋白 O-连接的糖蛋白 糖蛋白 3H标记半乳糖；唾液糖 N-连接糖链的初加工（内质网腔） 甘露糖 N-连接的糖基化蛋白在高尔基体中进一步加工 半乳糖 唾液酸 半乳糖 唾液酸 O-连接的糖基化蛋白在高尔基体进行 2.分泌性蛋白质部分肽链的水解 例如：人的胰岛素 内质网合成胰岛素原，含86个氨基酸残 基，有A.B两条肽链和起连接作用的C肽组成。 进入高尔基复合体后C肽被水解切除，成为有 活性的的胰岛素。 3、参与形成溶酶体（溶酶体酶的磷酸化） 末端带有甘露糖 的N连接寡糖链 溶酶体水解酶 信号斑 与信号斑识别位点结合 尿苷二磷酸- N-乙酰氨基葡萄糖 结合到催化 位点 在催化位点将磷酸化 的N-乙酰氨基葡萄糖 转移到甘露糖残基上 释放 寡糖链上的甘露糖 被磷酸化的溶酶体 水解酶 催化位点 识别位点 N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶 （三）Gc是胞内蛋白质的分选和囊泡定向运输的枢纽 1. Gc参与蛋白质的分选 蛋白质在Gc内加上不同分选信号，不同分选信号的蛋白质分子可被反面高尔基网膜上的专一受体识别、浓缩、分选。 分选蛋白： ER内驻留蛋白 溶酶体蛋白 驻留蛋白