20XX年菌种的生产与保藏培训课程.pptVIP

第三章 菌种的生产与保藏 ;一、菌种培育技术 ;食用菌的制种程序;母 种;原种、 栽培种;栽培种; 菌种生产必须在严格的无菌条件下进行。为了保证制种的成功，除必须掌握制种技术外，还需要一些基本的设备和用品。 1、接种设备 ⑴ 接种室 要求: ①关闭严密，便于熏蒸、消毒； ②空间不宜过大，一般长、宽、高均为2m即可; ③接种室外面最好有一个缓冲室； ④墙壁、天花板和地面都要平整、光洁； ⑤内装有紫外灯和日光灯。 ;;1、接种设备 ⑵接种箱 当菌种生产量不大时，可在接种箱内进行。它是用木条作成框架，以3mm厚的玻璃作箱壁。 要求： ①关闭严密，便于熏蒸； ②装有日光灯和紫外灯。 优点：搬动方便，操作人员不会受有毒气体危害。 缺点：容量小。 ;;1、接种设备 ⑶超净工作台 原理：超净工作台是利用过滤除菌的原理，先将空气过滤，得到无菌空气，然后将无菌空气从风洞打出，使工作台范围内成为无菌状态。 要求：放置工作台的房间要清洁，空气流动小，最好安装灭菌灯。 优点：有效可靠，操作使用方便，在夏季接种时，使操作人员感到舒适。 每台3000元左右，有条件的食用菌专业户，可选用这种先进的接种设备。 ;超净工作台;(一) 菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备;灭菌设备;(一) 菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备;(一) 菌种生产常用的设备和用具 3、培养设备;(一) 菌种生产常用的设备和用具 4、培养菌种的容器;母种-试管;原种、栽培种—菌种瓶或塑料袋;菌种瓶;(一) 菌种生产常用的设备和用具 5、接种工具;(一) 菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品;(一) 菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品;(一) 菌种生产常用的设备和用具 (二) 母种生产技术;(一) 菌种生产常用的设备和用具 (二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;⑴ 配方 ⑵ 配制方法（以PDA为例） 马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片→称取200g＋1000mL H2O→煮沸→双层纱布过滤→取滤液并补足1000mL＋琼脂→熔化＋其它营养物质→调节pH（用HCl或NaOH）→分装试???→灭菌（高压蒸气灭菌15-30min）→制成斜面→检查灭菌效果（即28~30℃培养2~3d） 其它天然培养基或综合培养基，如：玉米粉、黄豆粉、胡萝卜、麸皮等原料，加适量水煮汁过滤，取滤液与其它成分混合。 ;(二) 母种生产技术;⑴孢子分离法 利用孢子在适宜培养基上形成菌丝来获得纯菌种的方法。 ;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;(二) 母种生产技术;②悬钓法 此法主要用于耳类（黑木耳、毛木耳、银耳等）孢子的采集。 耳片（表面消毒） → 悬挂于培养基上方→培养→ →取出挂钩与耳片→培养→挑取先端菌丝→转管纯化→母种?;组织分离：指通过菇体组织分离纯种。 优点：操作简便、取材广泛、不易变异，保持原菌种优良种性。 方法： ①选择种菇（出菇早、无病虫害、柄短、肉厚、大小适中、5~6分成熟） ②组织分离; 选择种菇→表面消毒（75%酒精或0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观察→转管→纯种 上述分离物在25℃下，经3d~5d可看到分离物表面长出白色绒毛状丝，每隔1d~2d检查1次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养10d~15d，再作1次转管即得到纯种。 ;注： ⑴取组织块不要贪大，因组织块小易定植; ⑵有些食用菌不易用组织分离法获纯种； ⑶不同的食用菌切取部位和消毒方法不同。 如：1）红菇、乳菇等，因它们菇体细胞已泡囊化，再生能力极弱； 又如：2）银耳和木耳等胶质菌，它们子实体中菌丝含量极少，组织分离法不易成功。而只能取其生长的基质即菇木、耳木分离。 ; 概念： 由菇木、耳木、培养料等食用菌生长基质中的菌丝分离培养而成。这是利用潜在于寄主组织内的菌丝体获得纯种的方法。 （常用于银耳及木耳菌种分离）;段木内菌丝分离法： 取1~2cm菇木、耳木（子实体着生部位）→去皮→消毒（75%酒精或0.1%升汞浸泡1min）→切去四周木块→切成火柴杆粗细，0.5 cm长的小木梗→取1根放入试管斜面上→培养→取菌丝→转管纯化;(二) 母种生产技术;4、质量检验 对分离、引进或转管扩大的菌种，应经过质量鉴定，选优去劣，方可使用。 1）检验方法 ①外观鉴定 优良菌种：菌丝浓白、粗壮、富有弹性，则生命力强。如有子实体或茶褐色被膜，只要除去仍可使