临床细菌室厌氧菌培养基本程序-张秀珍.pptx

临床细菌室厌氧菌培养基本程序;内容;厌氧培养基本设备;厌氧菌培养的基本条件及设备; 厌氧培养的培养基;必备厌氧培养用培养基;改良厌氧血平皿配制;几种重要的厌氧选择培养基; 提供厌氧环境方法：;厌氧培养装置;厌氧标本的选择、采集和运送;可疑厌氧菌感染特征;需做厌氧血培养的高危人群;1.正确地选择标本; ;2.正确地收集标本;可做厌氧培养的标本; ;3.床边采集标本的步骤;4.血液以外无菌体液接种;5.不能立即接种的厌氧标本;厌氧标本采集的方法;厌氧标本的分离和鉴定;厌氧菌分离的基本分离步骤;厌氧菌的鉴定步骤和方法;直接涂片检查;;; 厌氧菌鉴定依据 根据菌体形态、染色反应、菌落性状以及对某些抗生素的敏感性等作出初步鉴定。最后鉴定是一系列生化及终末代谢产物。 1．形态与染色 仅供参考，因不同培养基，不同菌龄其形态与染色性不同，厌氧培养时间往往较长，因有的G＋变为G－。 2．菌落性状 不同厌氧菌菌落形状和性质不同，梭菌的菌落特点是形状不规则，而无芽胞厌氧菌多呈单个的圆形小菌落。 ; （1）? 色素：产黑色素普鲁沃菌培养2~10天可产生黑褐色或黑色色素，龋齿放线菌培养3~4天后产生粉红色色素，奈氏放线菌延长培养时间可产生黄褐色色素。 （2）? 溶血：产气荚膜梭菌在新鲜血平板上可形成双溶血圈，但同种的菌不同株则往往产生溶血性的差异，各细菌产生的溶血毒素不同，对不同动物红细胞溶解亦有差异。 （3）? 荧光：产黑色素普鲁沃菌，菌落在紫外线照射下，发出砖红色荧光，梭杆菌常发生黄绿色荧光，艰难杆菌发生绿色荧光。 3. 耐氧试验 厌氧菌必须做耐氧试验; 4. 药物鉴定试验 大多数类杆菌对卡那霉素耐药，梭杆菌属敏感，厌氧菌对灭滴灵敏感，非厌氧菌耐药。 5. 聚茴香脑磺酸钠（SPS）敏感试验 厌氧消化链球菌对50g/L的SPS溶液敏感，而绝大多数其它G＋球菌耐药 6. 生化特性 主要包括多种糖类发酵试验、吲哚试验、硝酸盐还原试验、触酶试验、卵磷脂酶试验、脂肪酶试验、蛋白溶解试验、明胶液化试验、胆汁内肉汤生长试验、硫化氢试验，其方法多种多样。 ; 7. 气液相色谱 气液相色谱技术（GLC）是一种以气体或液体为流动相，以涂固定液的载体为固定相。采用冲洗法的柱色谱分离技术。目前用来分析细菌终末代谢产物，结果可靠。 8．PCR、基因探针。 ;厌氧菌的鉴定;??单步骤 (适用无条件作鉴定单位);报告方式;9.厌氧菌的药敏试验;目前可推荐的厌氧菌药敏方法;质控菌株MIC范围;菌种保存技术要点：;参考菌株保存方法;1. 短期保存菌种：;2. 长期保存菌种：;3.厌氧菌的保存; ;4. 细菌耐药质粒的保存：;谢谢！！！