食品毒理学-第七章-化学毒物的生殖毒性.pptVIP

一、雄性生殖细胞的发生过程 一、雄性生殖细胞的发生过程 （一）对睾丸生精细胞的影响 （二）对内分泌功能的影响 （三）对性功能和生殖功能的影响 （一）精子生成分析 （三）睾丸中标志酶活性的测定 （五）雄性激素检测 （七）雄性生殖细胞遗传毒性检测 一、雌性生殖细胞的发生过程 （一）对卵细胞的影响 （二）对内分泌功能的影响 三、雌性生殖毒性的检测方法 第三节 致畸试验 一、动物致畸试验（1） 一、动物致畸试验（2） 二、体外致畸作用试验 第四节 繁殖试验 一、试验方法（1） 二、观察指标 第五节 胚胎毒性－胎儿动脉管畸形的研究方法（1） 第五节 胚胎毒性－胎儿动脉管畸形的研究方法（2） 课堂练习 * 　　精子的发生过程是指精原细胞发育成为成熟精子的过程。精子的发生过程始于胎儿期的原始生殖细胞。出生后，原始生殖细胞分化成精原细胞，后者直至青春期以前再曲细精管中处于休止状态。在青春期，在脑垂体促性腺激素的作用下，开始增殖，进行有丝分裂，形成两个单倍体的次级精母细胞，再经第二次成熟分裂，形成四个单倍体的精子细胞，精子细胞再经过一系列形态学变化成为具有特殊形态的成熟精子。随后由间质细胞包裹释放入输精管内，移入附睾后进一步成熟，成为具有受精能力和活动力的精子，进入精囊并在此贮存。 　　精子发生过程是在神经内分泌的精密调控下进行的。 第一节 雄性生殖毒性 表7-1 外源化学物作用时间与精子发育阶段 9 6 精原细胞 6～8 5 初级精母细胞 6～8 4 次级精母细胞 4～5 3 次级精细胞 3 2 后期精细胞 1～2 1 输精管和附睾内的精子 大鼠 小鼠 从给药到精子成熟经历的时间/周 受作用时精子发育阶段 1.棉酚 　　长期食用粗制棉子油－睾丸生精上皮丢失－睾丸内 精子、精细胞和精母细胞受损－精子细胞的顶体肿胀、 分离与碎裂－精子中段的线粒体螺旋鞘排列紊乱、嵴目 减少－通过葡萄糖和果糖代谢障碍抑制精子活力－精子 减少、不育 2.工业污染物二硫化碳－睾丸损害、精子生产障碍 3.铅、镉、汞、锰等重金属－精子减少 4.多种农药－精子减少、畸形、性功能减退 二、外源化学物的雄性生殖毒性 　　睾丸的功能受垂体前叶分泌的促性腺激素的调节， 而垂体分泌的促性腺激素又受下丘脑产生的促性腺释放 激素的调节。精子的生成是在神经分泌的精密调节和控 制下进行。 　　重金属铅可干扰下丘脑－垂体－睾丸轴的正常功 能，主要是影响促性腺释放激素（GnRH）的释放，表现 为卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（LH）、睾酮含量 降低。最终造成精子减少，活力减弱，性欲减退等。二 硫化碳亦可导致睾酮减少、精子生成障碍等。 　　外源化学物（化学毒物）如果造成生殖系统任何一 个环节的异常，则表现出雄性不育，即雄性性功能障 碍。如铅、镉、汞、锰等重金属。 （1）精子计数－数目减少量－确定有无毒害作用发生 （2）精子形态观察－头尾部的形态改变 （3）精子状态分析试验－静夜的pH、液化时间，精子 运动能力，蛋白质、脂质和微量元素的含量等－是否与 外源化学物有关 三、雄性生殖毒性的检测方法 （二）精子穿透试验 　　即精子体外受精实验，是检测精子在体外能否成功 穿透去透明带的金黄地鼠卵子而受精的试验，为综合评 价外源化学物对人类精子受精能力的影响、探明雄性不 育提供科学依据。 　　临床和动物试验中常检测乳酸脱氢酶同工酶x、山梨醇脱氢酶、6－磷酸葡萄糖脱氢酶的变化，并结合精子生成过程中各阶段细胞的功能和形态学改变，即可评价外源化学物的生殖毒性，并有可能探明毒性作用部位和机理。 （四）体外试验 　　体外试验主要是将哺乳动物的生殖细胞在体外条件下进行培养，并与受试外源化学物接触，观察生殖细胞的变化。 　　通过支持细胞和间质细胞等体外分离培养，测定支持细胞的乳酸含量和乳酸脱氢酶活性的变化以及测定间质细胞分泌的雄激素含量来判断外源化学物是否对所培养细胞的功能有影响。 　　亦可分离上述细胞，通过细胞计数和形态学检查的方法来判断。 　　雄性生殖系统无论生精过程、精子成熟过程，还是附属性腺的分泌活动，都需要有足够的睾酮，通过检测FSH、LH和睾酮的含量变化来判断外源化学物是否对雄性生殖产生影响。检测上述三种性激素含量有助于生殖毒性的评价以及生殖毒作用机制的探讨。 （六）显性致死试验 　　显性致死试验是通过给予雄性动物受试化学物，将其与未经受试物处理的雌性动物交配，观察雌性动物早期胚胎死亡情况，以评价受试物是否对雄性动物的生殖有损害作用的试验。 　　本方法系采用哺乳动物进行试验，较接近人体实际情况，主要观察指标为胚胎早期死亡，即观察子宫中活胎、死胎及吸收胎等书目，易于观察，实验技术容易掌握，不需要复杂的试验条件。缺点是不够灵敏。 　　传统检测方法：小鼠睾丸染色体畸变分析试验、小鼠精子畸变分析试验、黑腹