2015免疫学实验方法.pptVIP

Commonly used immunological methods Liu Kangkang kangll227@126.com 免疫学试验方法 免疫 识别和清除抗原性异物 可能有利，也可能有害 免疫系统具有区别“自己”和“非己”的能力 免疫耐受 免疫应答 免疫学检测与免疫学技术 一、抗原抗体的检测技术 二、免疫细胞的检测 三、细胞因子的检测-ELISA 四、免疫组织化学 五、免疫印迹技术 –Western Blotting 六、 流式细胞术 七、PCR技术 八、基因沉默技术 免疫学检测是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验手段及分子生物学技术在免疫学研究中的应用。   免疫学技术的应用极为广泛，疾病的诊断、疗效评价及理论研究等。 一、抗原抗体的检测技术 (一)细胞计数—细胞计数板 *准备细胞计数器：70%乙醇 →制备单个细胞悬液：贴壁细胞需胰酶消化 →加样 →细胞计数：100倍镜下观察，“计上不计下，计左不计右” 二、免疫细胞的检测 对机体参与免疫应答的细胞进行鉴定,计数及功能测定 细胞密度： 每毫升培养基中活细胞的个数=每个方块内细胞的平均数×细胞稀释比例×104 1 mm2×0.1 mm = 0.1 mm3 = 10-4cm3 = 10-4 ml (二)免疫细胞功能的测定