运动分离技术-吉林大学课程中心.pdf

第三篇 实验化学之分离与纯化 第 11 章 运动分离纯化技术 犹如赛跑运动一样，对于不同的分子或离子可 以通过其运动比赛得到分离，而相同的分子其运动 性能相同又会聚集在一起从而得到聚集。分子或离 子的运动机制多种多样，但都是从一个运动起点（即 加样的位置）运动到另一终点（检测点或参照点）， 一种情况是将运动的距离限定，由于组分运动的速 度不同，则走完全程的时间（即在规定路程内的滞留时间）则不同，先后冲刺终点的顺序则 不同，分别检测达到终点的组分身份并接收则可得到分离富集的结果；另一种情况是，不必 让组分运动完指定的行程，而是在规定的有效时间内运动，然后立即停止。如此，各不同组 分运动的距离则不同，也会得到不同层次的分离结果。前一种情况常常在柱内进行，称为柱 层析（或柱色谱），后一种情况常在平面内进行，称为平面层析（或平面色谱）。上述的运动 环境的构成，需要三个方面的要素： 一，分子自身的运动是无序和缓慢的，需要靠定向的 外力推动流动相并带动组分做定向的有规律的运动。该项工作由具有一定流动性能的液态或 气态物质完成，称为流动相；二，组分的运动要有一定的空间环境和运动介质（相当于跑道）， 并且运动介质对组分要有一定的滞留作用，以产生不同组分的运动差异。该构成要素称为固 定相；而构成层析色谱环境体系并承载固定相的物质被称为载体或支持剂，如柱层析的层析 柱、薄层层析的玻璃板、纸层析的纸等。 除上述层析的机械运动环境之外，也可将带有一定电荷的组分至于电场中，使其在电场 中进行定向运动，由于组分所带电荷种类、电量和分子量等特质不同，其运动方向和速度则 不同，借此可以达到分离富集的目的，这就是电泳技术。 层析和电泳类技术通过运动体系放大了组分间的特质差异从而达到分离纯化目的。因 此，此类技术更加适合于分离哪些在其他理化性质方面十分相近而采用其他经典方法无法实 现分离的组分，如同类物质、同系物、同分异构体及对映异构体等。 在运动分离过程中，为了掌握分子或离子的运动信息，此类技术常常需要结合其他检测 技术对运动分离的情况进行监测和监控，这种运动分离中的检测技术相当于运动赛场的裁判 系统。根据检测和监测到的相关信息既可以判断分离的状态和结果，也可以根据所检测到的 相关信息对组分进行定性、定量分析，从而实现分离与分析的一体化。 此类分离技术是基于分子或离子运动的分离，因此其分离更加精细和微量化，分离度更 大，回收率更高。不仅可以实现对映异构体的拆分，而且只要能够检测到相关信息，甚至可 以实现单个分子或离子的分离。 随着科学技术的不断发展，现代层析和电泳技术已经不仅仅是一个单纯的分离技术，而 是分离与分析相结合的综合实验技术，并在现代分离和分析科学中占据着十分重要的地位。 1 第 11 章 运动分离纯化技术 11.1 色谱技术概述 1903 年，俄国植物学家 M.C.Tswett （茨维特，1872－1919 年）在波兰的华沙大学研究 植物叶子的化学组成，他将碳酸钙粉末装入一细长的玻璃管中，然后将植物叶子的石油醚萃 取液倒在柱内的碳酸钙上，色素被碳酸钙吸附，然后他再用石油醚冲洗碳酸钙上吸附的色素， 在玻璃管内形成了三种颜色六条色带的分离结果。他把这种色带称为“色谱” （Chromatographie，1906 年他把此项发现和研究内容发表在德国植物学杂志上用此名，英 译名为 Chromatography ），色谱由此诞生。 1940 年，英国生物化学家 Martin 和 Synge 提出液-液分配色 谱，1941 年他们又提出气相色谱的可能性；1944 年，Consden 发展了纸色谱；1949 年，Macllean 制作薄层板，使薄层色谱法 （TLC ）得以应用；1952 年，Martin （时年42 岁）和 Synge （时 年 38 岁）发展了气相色谱，并获得了诺贝尔化学奖；1956 年， Stahl 开发了薄层色谱板涂布器，使 TLC 广泛应用；20 世纪 60 年代末，出现了商业高效液相色谱（HPLC ），但是由于当时泵 和检测器的发展滞后，使得 HPLC 在 20 世纪