蛋白质化学-公开课件.pptVIP

复习思考题 * 1.现有一个含有五种蛋白质的混合物，其pI分别是9.8、6.4、8.6、3.5、10.7，在pH为8.6的缓冲液中进行醋酸纤维素薄膜电泳分离，请在下图中表明点样位置及电泳结果 + - 2.常用于蛋白质定性和定量方法有哪些？试述其基本原理。 3.结合所学生化知识，简述蛋白质变性理论在医药学中的应用。 专业英文词汇 * 蛋白质 protein 编码氨基酸 coding amino acid 标准氨基酸 standard amino acid 肽键 peptide bond 肽单元 peptide unit 肽键平面 peptide bond plane 寡肽 oligopeptide 多肽 polypeptide * 多肽链 polypeptide chain 主链骨架 backbone 侧链 side chain 氨基酸残基 amino acid residue 谷胱甘肽 glutathione，GSH 一级结构 primary structure 二级结构 secondary structure α-螺旋 α-helix * β-折叠 β-sheet β-转角 β-turn 无规卷曲 random coil 三级结构 tertiary structure 四级结构 quaternary structure 氢键 hydrogen bond 离子键 ionic bond 盐键 salt bridge 疏水键 hydrophobic interaction * 二硫键 disulfide bond 胰岛素 insulin 分子病 molecular disease 等电点 isoelectric point，pI 电泳 electrophoresis 变性 denaturation 复性 renaturation 沉淀 precipitation 盐析 salting out * * * * * * * * * * * * * * * H * 由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成 功能基：-SH 解毒、抗氧化作用 还原型谷胱甘肽 GSH * 第二节 蛋白质的分子结构 上海中医药大学生化教研室制作 * 上海中医药大学生化教研室制作 一、蛋白质的一级结构 * 多肽链中氨基酸的组成与排列顺序 人胰岛素一级结构 二、蛋白质二级结构 * 某一段肽链中主链骨架盘绕折叠形成的空间排布，不涉及氨基酸残基侧链的构象 α-螺旋 β-折叠 β-转角 无规 卷曲 1.α-螺旋 * 0.50nm 0.54nm 氢键 α-碳原子 侧链 右手螺旋 3.6个残基/圈 螺距=0.54nm 螺旋直径0.5nm 每个肽键的C=O与第四个肽键的H-N形成氢键 2.β-折叠 * 肽链平行排列、呈锯齿状 顺向、逆向 肽链间-CO和-NH形成氢键 3.β-转角 * 三、蛋白质的三级结构 * 二硫键 极性基团 离子键 在二级结构基础上，由于侧链R基的相互作用，进一步盘曲折叠构成的特定空间结构 三级结构中的作用键 * 氢键 范德华力 离子键 疏水键 二硫键 以疏水键为主 四、蛋白质四级结构 * 由两条或两条以上的具有独立三级结构的多肽链相互作用，经非共价键连接成特定空间构象 蛋白质1～4级结构 * * 第三节 蛋白质的理化性质 * 两性电离 等电点 胶体性质 沉淀 变性 复性 紫外吸收 颜色反应 蛋白质理化性质 一.蛋白质的两性电离和等电点 * 正离子 兼性离子 负离子 pH＜pI pH = pI pH＞pI 血清蛋白电泳（electrophoresis） * 血清蛋白电泳 利用蛋白质等电点不同、分子大小不同特性等分离血清蛋白质 二.蛋白质的胶体性质 * 分子大小：1~100nm，属胶体分散系 稳定的胶体溶液：同种电荷和水化膜 带正电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 带负电荷的蛋白质 三.蛋白质的沉淀（precipitation） * * 盐 析 重金属盐沉淀 有机溶剂沉淀 生物碱试剂沉淀 沉淀蛋白质的方法 * 盐析 salting out 蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐溶液使之从溶液中析出 原理： 破坏水化膜中和电荷 常用盐： 硫酸铵 硫酸钠 氯化钠 特点：蛋白质不变性 * Di分段盐析 沉淀球蛋白 沉淀清蛋白 半饱和 (NH4)2SO4 饱和 (NH4)2SO4 * 有机溶剂沉淀蛋白质 破坏水化膜 乙醇 丙酮 蛋白质易变性 需低温进行 原理 常用 有机溶剂 特点 * 重金属离子沉淀蛋白质 重金属 离子 特点 pH＞pI 蛋