圆二色谱CD原理.ppt

CD能够提供的信息： primary structure, secondary structure tertiary structure Alpha-helix,　beta-sheet 肽链骨架的构象变化 蛋白质的紫外吸收光谱主要有两个峰： 190-250nm：肽键 280-290nm：酪氨酸tyr，色氨酸trp 10、 J-810圆二色光谱仪 S1-S2:第一级单色器；S2-S3:第二级单色器; M：球面反光镜；P：晶体石英棱镜；L:透镜；F:滤光器； 由CDM交互形成的左、右旋圆偏光通过光学活性物质，透射光强度随时间的变化 当调制电压过其峰值（正和负）时， εR＞εL时，透过的右旋圆偏光的光强对应于最大值，而左旋最小（实线）； εR＜εL时，透过的左旋圆偏光的光强对应于最大值，而右旋最小（虚线）。 PMT的输出信号由正比于IA的直流分量和正比于S的交流分量所组成。 直流成分 IA=（IL+IR）/2 交流成分S相当于圆二色性 透射光强的变化频率与外加调制电压的频率相同。 圆二色光谱仪工作原理 用相同强度，相同频率的左、右旋圆偏光交替照射样品测得透过样品后的强度IR和IL 由于IR和IL十分接近，令IA=（IL+IR）/2，S= IR – IL 只放大相应于S的PMT输出电压Es（交流信号），而不放大相应IA的输出电压EA。（适当选取放大倍数G值，使ESG与EA可比）。 P