实验一人类外周血染色体标本制备一.ppt

* * 实验一 人类外周血染色体标本制备 一、实验目的 初步掌握人类染色体标本培养和制备的基本方法。 二、实验原理 正常情况下,外周血中的小淋巴细胞,几乎都处在G1期或G0期,外周血细胞中是没有分裂相的。1960年发现外周血中的小淋巴细胞可以在植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA)分裂刺激剂的影响下,在形态上转变为淋巴母细胞,进行有丝分裂。这样经过短期培养,秋水仙素的处理,低渗和固定,就可以迅速而又简便地获得体外生长的细胞群体和有丝分裂相。本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。 三、实验步骤 1、采血 (已完成) 2、培养(lymphocytes cell culture) (已完成) RPMI1640培养液,37℃?0.5℃恒温中培养72小时。 3、秋水仙素(colchicine)处理 在终止培养前2-3小时,加入秋水仙素。 (已完成) 4、离心 (centrifugalization )

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