γ干扰素释放试验在结核感染临床诊断中的应用.pptxVIP

结核感染酶联免疫斑点试验()在结核感染诊断中的应用 王 强 年月 概 况 目前，结核病仍然是全球严重的公共卫生问题之一。据估计, 全球有约 亿人感染结核分枝杆菌,每年有约万人死于结核。 我国是世界上个结核病高负担国家之一, 结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的倍以上。 概 况 结核病临床表现多样, 可累积全身组织器官, 肺外结核更加隐匿, 临床明确诊断十分困难。 既往辅助诊断：结核菌素皮试( , )、体液涂片镜检、分枝杆菌培养、组织病理、结核抗体检测、结核检测等 结核菌素皮试()长期以来作为辅助诊断结核感染的重要手段。 缺陷 在易受结核感染的免疫力低下人群中, 敏感性低; 结核菌素纯蛋白衍生物()是多种蛋白的混合物。其中，含有非结核分枝杆菌及卡介苗( )的抗原成分, 接种人群的“假阳性”率高。 皮试的操作和结果的判断，存在一定主观性, 降低了检查的准确性。 概 况 结核分枝杆菌进入人体后，能够诱导机体产生特异性中央记忆细胞(，)和效应型记忆细胞(，)。在结核菌被清除前，此类细胞不会消除。当这些细胞再次接触到结核菌蛋白质时，就会释放细胞因子，γ干扰素是其中的一种。 根据结核菌进入人体后的免疫应答结果, 可以分为：无结核感染、活动性结核、潜伏性结核和治愈四种状态。 免疫力正常的感染者, 获得性细胞及体液免疫，只能控制结核感染 结核杆菌特异性抗原 的基因编码是结核分枝杆菌特有的基因 在卡介苗菌株和绝大多数非结核分支杆菌中不存在 按照基因编码产生的蛋白（ 和）具有高度特异性。找到由此蛋白诱导产生的γ干扰素，就能准确判断体内是否存在结核菌。 结核感染酶联免疫斑点试验() 通过酶联技术使含有这种体征性细胞因子(γ干扰素)的细胞着色，形成可识别斑点，具有直观、快速诊断结核感染的优点。 是以酶联免疫技术检测结核感染的新方法。是目前最敏感的抗原特异性细胞检测方法之一。 是在单细胞水平检测γ干扰素的分泌情况。 结核感染酶联免疫斑点试验() 年通过欧洲批准 年通过加拿大批准 年通过美国审批 结果临床应用及评价 结果究竟有什么临床意义？ 阳性能否肯定结核诊断？ 哪些人需要进行筛查？ 和既往诊断方法比较，其优缺点是什么？ 试验方法 空白对照组阳性(植物血凝素)对照组抗原组抗原组 实验结果解读 实验误差的判断：空白组斑点＜个，并且阳性对照组＞个，视为实验有效。 如果空白对照＞个，或阳性对照组＜个，均视为实验条件不正常。该条件下得出的实验结果属于“不确定”。实验室应该查找原因，重新检测。 实验结果判断有反应性 任一抗原组出现斑点，称之为”有反应性“。有反应性判断与空白对照斑点数量相关。符合以下条件之一的判断为”阳性“ .当空白组斑点数小于时，任一实验孔斑点数减去空白对照后≥, 结果判为阳性； .当空白对照孔内斑点数大于时, 任一实验孔斑点数大于空白对照的倍, 结果判为阳性。 实验结果判断无反应性 不符合“有反应性”条件，属于“无反应”。即视为阴性。 实验结果判断假阴性 当阳性对照组结果为“不确定”(＜个)，且抗原和孔均”无反应“时，试验结果判断为”不确定“。 敏感性与特异性评价 由于潜伏性结核感染的诊断无金标准, 敏感性评价仅在培养或病理阳性的活动性结核患者中进行。 等对例受试者进行研究。其中，绝大多数是结核培养阳性、 阴性的成年人。结果 综合敏感性。在免疫力低下的人群中, 依然维持较高的敏感性。 等报道了例非洲儿童的随访结果, 平均年龄 岁, 约 阳性, 多数合并营养不良。对于确诊或高度怀疑结核的病例, 阳性率, 阳性率为()。提示：年龄、 感染状态和营养不良的严重程度对结果无影响, 但均能导致 敏感性下降。 敏感性与特异性评价 等研究了例肺外结核患者， 结果提示：对于活动性肺外结核, 和的敏感性分别为和()。 等的分析研究了名受试者, 为无结核接触史的健康成年人, 其综合特异性为 敏感性与特异性评价 国内研究数据显示敏感度和特异度差别较大，敏感性％，特异性％～％，但多数文献报道的敏感度和特异度％，优于试验。 考虑到我国肺结核患者中，菌阴者所占比例较高，在这类患者缺乏细菌学依据时，斑点试验能够给病人的诊断提供帮助。 结核活动性评价 结核分支杆菌()进入人体后，仅有一小部分人发展为活动性结核病，大多数人为结核潜伏感染者() 的斑点数虽然不能精确地与结核活动程度呈正相关, 但仍然存在着结核活动程度越高斑点数越多的趋势。 阳性人群, 定期复查监测斑点数变化很有必要。如果 斑点数在短时间内显著增加, 则强烈提示体内结核活动, 给予预防性治疗十分必要 。 潜伏病人的筛查 敏感性优于结核菌素试验，且不受卡介苗接种的影响 较少受到其他分支杆菌的影响 阴性意义大于阳性，排除诊断更佳。 治疗效果