医学免疫学实验-淋巴细胞体外增殖功能检测.ppt

实验材料 小鼠 75%酒精 PBS缓冲液（PH7.4） 红细胞裂解液 RPMI-1640不完全培养液、胎牛血清 刀豆蛋白A CCK8检测试剂盒 眼科剪刀、镊子、酒精棉球、注射器枕芯、无菌平皿、尼龙指套、15mL离心管 血球计数板、计数器、正置显微镜、倒置显微镜 微量移液器、枪头 离心机 酶标仪 实验结果 调零组 未刺激组 ConA 5ug/ml ConA 2.5ug/ml 　 　 　 　 　 　 　 　 2x106/ml 0.231 0.2685 0.269 0.2619 0.269 0.2851 0.3203 0.2686 4x106/ml 0.2276 0.3171 　 0.3407 0.322 0.333 　 0.4445 0.4787 0.5282 　 　 　 　 　 　 　 　 0.0895 0.1131 0.0944 0.1054 0.2169 0.2511 0.3006 注意事项 脾脏单核细胞分离过程中严格无菌操作。 红细胞裂解时间不要过长，以免破坏其他细胞。 选择合适细胞培养浓度，及ConA刺激浓度。 酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰。 CCK8加入时，注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数。 CCK8细胞毒性非常低，因此加入CCK8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。 如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8