DB 34T 1539-2011 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR 法.pdf

ICS 07.100.30 C 53 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 1539—2011 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR 法 Testing for Salmonella in Poultry eggs Qualtative polymerase chain reaction(PCR) method 2011 - 11 - 15 发布 2011 - 12 - 15 实施 安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 1539—2011 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心提出。 本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。 本标准主要起草人：陈戈、张波、汪永信、安虹、刘娟娟、程潇。 I 龙牛网 下载 DB34/T 1539—2011 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法 1 范围 本标准规定了禽蛋中沙门氏菌的荧光 PCR 检测方法。 本标准适用于禽蛋及禽蛋制品中沙门氏菌的快速检测。 本标准适用于该产品的风险预警监测及相关科学研究。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB/T 4789.19 食品卫生微生物学检验 蛋与蛋制品检验 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 CT 值 PCR 扩增过程中荧光信号强度达到阈值所需要的循环数。 4 方法原理 本方法是基于 TaqMan 实时荧光PCR技术，选取沙门氏菌种属特异性的 invA 基因序列设计引物和 两端有荧光基团标记的寡核苷酸探针。PCR 每进行一次循环，PCR 产物的量与荧光信号的强度呈对应关 系，当荧光信号超过所设定的阈值时，荧光信号可被检测出来。通过观察实时 PCR 扩增曲线，对样品 中的沙门氏菌进行快速检测。 5 设备和材料 5.1 实时荧光 PCR 仪。 5.2 离心机。 5.3 微量移液器和灭菌吸头（10 μL、100 μL、200 μL、1000 μL）。 5.4 恒温培养箱。 5.5 恒温水浴锅。