流式细胞仪分析技术及应用 .pptVIP

(二)双参数数据的显示 Two-Parameter Data Displays 细胞双参数测定不仅能提供二个参数各自与细胞 数量的关系，更重要的是获得了这二个参数之间的相关关系，其中包含了更多的生物学信息。双参数数据显示最常用的是二维的散点图( Dot Plot )。在二维图上，横轴代表第一个测量参数，纵轴代表第二个测量参数。 纵轴与横轴分别代表被测细胞的两个测量 参数,在图中每一个点代表一个细胞 1 、点图 用等高线来表示细胞数，在一条等高线上细胞数相 同，不同的等高线上细胞数不同。 2 、二维等高图 纵轴与横轴分别代表被测细胞的两个测量参数,Z轴为细胞数。 3 、假三维等高图 三维坐标匀为参数（散射光或荧光）而非细胞数。 (三) 三参数直方图 一般利用所得参数的两两组合并利用设门（Gate) 技术，来分析参数之间的相互关系。 （四）流式细胞仪的多参数分析 1 、Region设置 2 、 设置 Gate 样品制备：单细胞悬液 特定荧光染料的选择：光谱重叠 阴性对照的设置:检测标本的重复性 质量控制 第三节 流式细胞仪免疫分析的技术要求 细胞碎片 细胞团块 离心漂洗 固定剂 一、免疫检测样品制备 淋巴细胞分离液分离外周血中单个核细胞。 Ficoll,40kd，高密度，低渗透压，无毒性。 （比重为1.0177