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实验五;实验目的与要求 (p9/32);微生物培养;一、用固体培养基分离纯培养;一、用固体培养基分离纯培养;无菌操作:; 不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征(形状、颜色等),可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据;菌落的描述:形态、表面和边缘特征;;同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落;一、用固体培养基分离纯培养;;一、用固体培养基分离纯培养;;3、平板划线法;3、平板划线法;一、用固体培养基分离纯培养;二、选择培养分离;三、选择培养分离;1. 利用选择平板进行直接分离;
2. 富集培养;组成成分:乳糖、胆盐、柠檬酸铁、柠檬酸纳、煌绿、中性红、硫代硫酸钠等,强选择性抑制大肠杆菌,分离沙门菌
煌绿、胆盐、柠檬酸纳抑制非肠道菌
大肠杆菌分解乳糖而产酸,使胆盐析出,菌落中心浑浊呈深红色,柠檬酸铁可使产生硫化氢的菌落呈黑色
硫代硫酸钠缓和胆盐对沙门氏菌的有害作用,中和煌绿、中性红的毒性,使大肠杆菌的红色菌落更加鲜艳;麦康凯培养基
乳糖、胆盐,弱选择性,中性红,分离肠道致病菌
中性红指示剂
pH感应范围6.8(红色)到8.0(黄色)
分解乳糖产酸,菌落颜色呈红色
沙门氏菌、志贺氏菌不分解乳糖,菌落颜色与培养基相同
胆盐有助于沙门氏菌的生长,抑制其他细菌;常用的选择培养基;
三糖铁琼脂或克氏双糖铁
三糖铁琼脂含有乳糖、蔗糖、和葡萄糖,蔗糖:区别普通变形杆菌(+)、沙???氏菌(-)
克氏双糖铁成分 蛋白胨; 牛肉膏 ; 酵母膏 ;乳糖 ; 葡萄糖; 氯化钠 ; 柠檬酸铁铵 ;硫代硫酸钠 ; 琼脂 ;酚红为指示剂,黄色为产酸,红色为产碱
观察克氏双糖接种后斜面、底层产酸、产气、产H2S的情况,通常大肠杆菌斜面不产酸、底层产酸产气、不产H2S;微生物大小测量原理(P48);操作步骤;今天的实验;步骤;实验报告;思考题;下次实验
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