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(三)灭菌法的几个重要参数指标 D值——耐热参数 Z值——灭菌温度系数 FT值——T温度下的灭菌时间 F0值——标准灭菌时间 灭菌率L(Lethal rate)(致死率) 1.D值——耐热参数 1)定义:将一含微生物的样品在一定的温度下杀菌,当样品中的微生物消灭90%时,所需的时间,又称九成杀灭时间。(Decimal reduction time)即细菌数减少一个对数单位所需的时间。 描述微生物对热的耐受性。 D值定义图: 2)测定D值 用已知微生物数的悬浮液接种至样品溶液。 取若干个样品,至少用三种不同的时间曝热(在一定的温度下)。 以微生物存活数的对数值为纵坐标,以曝热时间为横坐标作图,得一直线,D值即为该直线的斜率负倒数。 3)影响因素 不同微生物具有不同D值。D值越小,证明微生物抗热性越弱。曝热时间较短即可杀灭九成。 同一微生物,曝热温度T越高,D值越低(图3) T↑,lgN下降得快,D小; T↓,lgN下降得慢,D大 环境条件(介质)(表1) 表1 介质对D值的影响 例:某样品在121℃下曝热3分钟,微生物数由2×105降低至8×103个。求D值。 解D= = =2.146min 2. Z值——灭菌温度系数 1)定义: 使D值减少90%所需增高的温度。(即D下降一个lg) 描述微生物对温度变化的敏感性。 2)测定Z值 至少用3个不同温度,分别测出某一个微生物在此三个温度下的D值。 以lgD为纵坐标,温度T为横坐标,画出一直线。 Z值即为此直线斜率负倒数。 3)定义图(图4) ? ? Z=- = = (若△lgD=lgD1-lgD2=1,则Z=T2-T1) lgD2-lgD1= D2/D1=10(T2-T1)/Z 4)影响因素 不同微生物,有不同Z值。 同一微生物在不同溶液中,Z值不同(表2) Z值越小,斜率越大,→T↑→D值变化大 Z值越大,斜率越小,→T↑→D值变化小 即Z值越大,此微生物对温度变化的敏感性越弱,企图通过升高温度来加速杀灭微生物的效果就不明显。 表2 嗜热脂肪杆菌在不同溶液中的Z值 例:设Z=10℃,T1=110℃,T2=121℃。试分析T1、T2下的灭菌效果。(10-1.1=0.079) 解:由Z= ,可得:10= =-1.1 =0.079 T1=110℃下, 灭菌1min 与T2=121℃下,灭菌0.079min等效, 或 =12.6 T2=121℃下, 灭菌1min与T1=110℃下,灭菌12.6min等效 3.FT值——T温度下的灭菌时间 1)定义:在一定的灭菌温度与已知Z值条 件下的等效灭菌时间。 FT=DT×△lgN DT:T温度时的D值。 △lgN:T温度下灭菌程序使微生物下降 的对数单位。(图5) 若灭菌前微生物总数N0,则在T温度下杀灭至100所需时间为:FT=DTlgN0 FT可理解为:灭菌程序赋予被灭菌品在T温度下的灭菌时间。 5.灭菌率L(Lethal rate)(致死率) 1)定义:指在温度T下,灭菌1min所获得的标准(T=121℃)灭菌时间L=D121/DT 2)物理意义 温度为121℃时杀灭90%微生物需D121=A min,温度T时,杀灭90%的微生物需DT=B min。即121℃曝热A min与T℃曝热B min的灭菌效力相当。 故L=D121/DT表示T℃下曝热1min相当于在121 ℃下曝热A/B min。 ∵Z= , ∴D2/D1=10(T1-T2)/Z 令T2=121,T1=T, 则 L=D121/DT=10T-121/Z ………………① ∵FT= DT×△lgN ,F0=D121×△lgN ∴L=D121/DT=F0/FT……………………②∴FT=F0/L ……………………………③(表3) 由式L=10T-121/Z,可知 当Z一定时,T↓→L↓,当T<100℃时,L→0 即 当温度低于100℃时,L可忽略不计。 表3 Z=10℃时,不同温度下的灭菌率和T灭菌时间 例:T=120℃时,∵Z= ∴ L= =0.7
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