第二章核酸结构以及功能.ppt

* 茎环结构或发夹结构 核酸分子复性和杂交 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 鉴定两种核酸分子间的序列相似性 检测待检样品中是否存在某些专一序列 是基因芯片技术的基础 第五节 核酸酶 Nuclease 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)： 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 5’ 5’ 3’ 3’ 外切位点 外切位点 内切位点 内切位点 限制性核酸内切酶： 有严格的序列依赖性，是基因工程中的重要工具酶。 核酸酶的功能 生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 体外重组DNA技术中的重要工具酶 核酶 (ribozyme) 某些小RNA分子具有催化特定RNA降解的活性，这些具有催化作用的小RNA称为核酶，或催化性RNA。 Cech和Altman由于核酶的发现1989年获Nobel 化学奖。 催化性DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。 * DNA由两条反向平行的多聚核苷酸链构成。两条链围绕同一个螺旋轴形成右手螺旋。 * Story、X-ray * Story、X-ray * Story、X-ray * Story、X-ray * * 三股螺旋的DNA ? 1957年发现三链核酸的结构 当双链核酸的一条链为全嘌呤核苷酸链，另一条链为全嘧啶核苷酸链时，就会转化成三链核酸的结构 ? 1963年提出DNA的三螺旋结构 通常是一条同型的寡核苷酸链与寡嘧啶核苷酸-寡嘌呤核苷酸双螺旋的大沟结合。 * DNA经过多次折叠，被压缩了8000～10000倍，组装在直径只有为数微米的细胞核内。 * * Avery and his colleagues concluded that the DNA extracted from the virulent strain carried the inheritable genetic message for virulence. Not everyone accepted these conclusions, because protein impurities present in the DNA could have been the carrier of the genetic information. This possibility was soon eliminated by the finding that treatment of the DNA with proteolytic enzymes did not destroy the transforming activity, but treatment with deoxyribonucleases (DNA-hydrolyzing enzymes) did. * 1952年，赫尔希和蔡斯用一种病毒-大肠杆菌T2噬菌体作为实验材料，完成了另一个更具说服力的实验。 * 1952年，赫尔希和蔡斯用一种病毒-大肠杆菌T2噬菌体作为实验材料，完成了另一个更具说服力的实验。 The Hershey-Chase experiment. Two batches of isotopically labeled bacteriophage T2 particles were prepared. One was labeled with 32P in the phosphate groups of the DNA, the other with 35S in the sulfur-containing amino acids of the protein coats (capsids). (Note that DNA contains no sulfur and viral protein contains no phosphorus.) The two batches of labeled phage were then allowed to infect separate suspensions of unlabeled bacteria. Each suspension of