第九章聚合酶链反应.ppt

第九章 聚合酶链反应 （Polymerase Chain Reaction. PCR） 每个生物医学工作者都应做到 1)掌握PCR概念与内涵 2)掌握特异性扩增的原理 3)掌握PCR百万倍扩增目的DNA片段原理 4)学会PCR引物的设计，学会PCR操作技术 5)了解PCR的优缺点？应用前景？ 一、问题提出 背景:  分子生物学、遗传学的兴起， 反向生物学的诞生 （核酸、遗传物质，基因型→表型）。 共同障碍： 如何在短时间内快速、获足够量、纯净的、 特异的目的DNA片段/基因供使用，可检测。 1．基础理论研究的需要  DNA重组、基因克隆、HGP测序，探针制备 2．实际应用的需要  基因工程（基因表达）、基因诊断、基因治 疗，基因预防等给人类带来希望。 二、PCR的基本概念 概念 由一对引物介导，在体外对特定DNA片段进行 快速、酶促、扩增技术。 简称PCR：聚合酶链反应 DNA扩增、基因扩增、基因富集技术。 前提：人工合成一对特定引物作向导， 始动DNA合成。 酶促：体外试管内进行酶促生化合成 （非化学合成）。 靶子：特导扩增目的靶序列（目的）。 高效：极微量模板、百万倍扩增 快速：短时高速完成实验。 三、PCR工