第五章微生物概述.pptVIP

第四节 细菌形态的检查 细菌的蛋白质是兼性电解质，在不同的pH时可带不同的电荷，在等电点时所带阳电与阴电相等。细菌的导电点较低，革兰阳性菌的等电点为pl 2～3，阴性菌为pl 4～5， 故在近于中性的环境中，．多带阴电，易与带阳电的碱性染料结合而着色。因此，细菌染色多用碱性苯胺染料，如美蓝、碱性复红、龙胆紫等。 染色法分为单染与复染两种。单染只用1种染料染色，如美蓝、复红，可观察细菌大小、形态与排列形状，但由于细菌均染成同一颜色，不能鉴别。复染采用2种以上染料染色，可将菌染成不同颜色，便于鉴别细菌。常用者有革兰染色法(Gram’s Stain)等。 第四节 细菌形态的检查 附：革兰染色法 涂片：用纱布擦净玻璃片，以无菌接种环取一小滴无菌生理盐水，然后用无菌接种环挑取少数菌苔(落)或液体培养基培养物(不必加盐水)，在玻璃片中央涂成一薄膜。 干燥：涂片后放室温中自然干燥。 固定：将玻片迅速通过火焰3次(其目的是杀死细菌)，使菌体与玻片粘附牢固，以及改变对染料的通透性。 初染：滴加结晶紫染液于已固定的玻片上，染1 min，水洗。 媒染：滴加碘液，作用1 min，水洗。 脱色：加95％酒精于涂片上，轻轻摇动7～8次，使均匀脱色至涂面无紫色或稍成淡紫色，立即水洗。 第四节 细菌形态的检查 复染：用石炭酸复红稀释液染0.5min，水洗，用滤纸吸干。于