植物组织培养常用培养基的成分.PPT

第三章 植物組織培養常用的成分培養基 培養基的成分直接關係到培養物的生長及分化，因此了解培養基的成分、特點及其配製對實驗的成功與否至關重要。自然狀態下生長的綠色植物由於能進行光合作用，並能合成自身生長發育所需的有機成分及生長因子，因此只要吸收土壤中的無機礦物元素就能正常的生長。 進行植物組織培養時，由於只是切取植物體的一部分，他們無法合成生長發育所需的全部物質 ，加上人們對植物體的各種組織和器官所需營養成分的了解不多，因此對培養基組成分的探索曾走過一段漫長極艱辛的路程。 沒有任何一種培養基可以適合所有類型的植物，或其組織器官，也沒有任何一種培養基可適合同一種植物各階段的生長及發育，目前所使用的培養基都是在前人研究的基礎上經過綜合分析及改進而成的。 目前所使用的各種培養基，其主要成分大致可將其分劃分為幾大類，包括： 1.無機營養成分 ─ 含大量元素、微量元素 及鐵鹽。 2.有機營養成分 ─ 包括維生素及氨基酸。 3.植物生長調節物質 ─ 包括植物激素及植 物生長調節劑。 4.碳水化合物(醣類)。 5.其他 ─ 部分培養基會添加活性碳、滲透調 節劑或天然植物組織提取物，如椰子水等。 6.固定劑，如洋菜。 一、無機營養成分 無機營養成分就是植物所需的礦物質或無機元素對植物的生長、發育產生非常重要的作用。如： 1.氮(N)、硫(S)、磷(P)是蛋白質、氨基酸、核酸和許多生物酶主要的組成份，其與上述物質的結構、功能、活性有不可或缺的關係。 2.N佔蛋白質含量的16-18%，是植物的生命元素；P是高能化合物ATP的主要成份，在能量代謝及生物合成中扮演重要角色，P也是DNA的組成份之一，與生物的遺傳、代謝及生長發育有直接的關係。 3.K在纖維素、木質素的合成過程中扮演重要角色，也是體內多種酶的活化劑，K元素充足能使莖桿堅韌，植株強壯。 4.S是胱氨酸及甲硫氨酸等含硫氨基酸的主要成分，與蛋白質的合成有關。 5.鎂(Mg)是葉綠素分子結構的一部分，缺鎂則葉綠素合成受阻，植物無法進行光合作用；Mg也是染色體的組成分，參與細胞的分裂過程。 6.鈣(Ca)是細胞壁的組成份，同時與糖的運轉有關，缺乏時細胞壁形成受阻，幼苗腐爛壞死。Ca也是細胞中重要的信息分子，能活化各種酶，以調節植物對環境的改變。 7.根據植物對不同元素需要量的多寡，而將元素區分為大量元素及微量元素，大量元素在培養基中的濃度大於0.5mmol/L，而微量元素的濃度則小於0.5mmol/L。 (一)大量元素 ─ 常用大量元素分列如下： 1.氫(H)、碳(C)、氧(O)：H2O、糖。 2.氮(N)：(NH4)2SO4、NH4H2PO4、KNO3、 Ca(NO3)2及NH4NO3等。 3磷(P)：KH2PO4、NH4H2PO4及NaH2PO4等。 4.鉀(K)：KNO3 及KCl。 5.鈣(Ca)：CaCl2及Ca(NO3)2 。 6.鎂(Mg)：MgSO4及MgCl2。 7.硫(S)：各種硫酸鹽。 (二)微量元素 培養基中的微量元素包括鐵(Fe)、錳(Mn)、銅(Cu)、鋅(Zn)、氯(Cl)、硼(B)、鉬(Mo)等。這些元素有的能影響蛋白質及酶的活性，有的參與生物新陳代謝的調節或參與某個生命活動的過程。例如： 1. Fe ─ 是酶的重要組成份也與葉綠素的成分有 關，缺鐵時細胞分裂停止。 2. Mn ─ 在葡萄糖分解過程中扮演重要角色，能 活化醣解作用以及作為三羧酸循環中某 些酶的活化劑。 3.B ─ 能促進糖的運輸，影響植物花器的發育 和受精作用，還具備抑制有毒酚化合物的形 成。缺B時細胞分裂停滯，癒傷組織表現老化 現象。 4.Zn ─是吲哚乙酸生物合成的必需元素，也是 谷氨酸脫氫酶、乙醇脫氫酶的活化劑。 5.Cu ─是細胞色素氧化酶、多酚氧化酶的成 分，可影響細胞的氧化還原反應。 6.Mo ─ 是硝酸還原酶和鉬鐵蛋白的金屬成分。 7.Cl ─ 是光合作用及水解過程的活化劑，能促 進氧的釋放和NADP(輔酶)的還原。 由於Fe元素很不安定，很容易產生沉澱，因此在配製培養基時，常將FeSO4與嵌合劑乙二胺四乙酸鈉(Na2EDTA)先分別配成溶液，再相互混合成嵌合鐵，以防止沉澱，並幫助植物吸收。 為了使用方便，無論是大量元素還是微量元素，都要先配製成母液(Stock solution)，並貯存在4℃的冰箱中。 常用的微量元素分列如下： 鐵(Fe)：FeSO4。 銅(Cu)：CuSO4。 鉬(Mo)：Na2Mo4。 鎳(Ni)：NiCl2。 錳(Mn)：MnSO4 。 鋅(Zn)： ZnSO4 。 鈷(Co)：C