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细胞生物学实验指导 主编 朱卫平 湖南农业大学植物科学实验教学中心 二○○六年七月 目 录 实验一 细胞形态、大小与显微结构观察………………………1 实验二 细胞膜的渗透性………………………………………5 实验三 叶绿体的分离与荧光观察……………………………7 实验四 线粒体和液泡系的超活染色与观察………………11 实验五 细胞凝集反应………………………………………17 实验六 DNA 的 Feulgen 染色法………………………………19 实验七 PAS 反应法显示多糖…………………………………22 实验八 植物细胞骨架的光学显微镜观察…………………24 实验九 植物染色体标本的制备与观察……………………26 实验十 细胞电融合方法…………………………………29 综合大实验……………………………………………………39 一 石蜡切片法………………………………………………39 二 半自动显微镜摄影技术…………………………………4 1 三 全自动显微照相技术……………………………………44 四 暗室技术—印相与放大…………………………………47 1 实验一 细胞形态、大小与显微结构观察 一、实验目的 1、观察各种不同细胞的形态大小，从而对细胞的分类，进化 及分化有所了解。 2、判断和识别光学显微镜下各种细胞器的形态，大小和数目。 3、掌握普通光学显微镜及测微尺的使用方法。 二、实验原理 生物种类繁多，形态大小各异．构成生物有机体的最基本结 构和功能单位—一细胞山冈其物种、部位和功能不同在形态与大 小上呈现一些区别。由于细胞比较小，我们借助于显微镜就可以 观测出细胞形态大小的差异。 光学显微镜的最高分辨率为 0.2 μm，而细胞器大郎分在 0.1 μm 和10μm 之间，所以光学显微镜下可见到一股细胞器的外部形 态。较大的细胞器和细胞核，质体等还可见到其细微结构。 细胞器往往由特殊物质组成，因而可通过对特异物质的区别 染色把各种结构区分开束，每种细胞器都有特殊的形态、大小、 分布位置及数目，这也是我们判断。识别细咆器的依据。而每种 细胞器在不同细胞、不同发育时期和不同生理状态下的形态大小 会有所不同。所以细胞器的观察可用来判断细胞的生理状和发育 情况。投们在取材和观察上要注意各种细胞在不同细胞中的特殊 性。 三、实验用品 1、器材 显微镜、测微尺 1 2、试剂 Wright 溶液：Wright 真粉剂0.1g 甲醇60ml 苏木精、硝酸银等 3、材料 真核、原核细胞涂片及切片，动、植物不同组织的切片及新 鲜材料（见实验方法中所列)。 四、实验方法 (一)细胞形态与大小的观测 1、用目镜测微尺分别在高倍镜下和油镜下测量镜台测微尺， 从而算出称所用显微镜中目镜测微尺每格所代表的 际长度。 2、用高倍镜及油镜检测各种切片，并且用目镜测微尺测量细 胞和细胞核的长、短径的长度。 3．选取细胞膜和核膜界限清晰的切片或涂片测量。测量时可 旋转目镜 （测微尺)及移动载玻片，置被测细胞于测微尺轴线上。 4．根据测量结果计算各种细胞及细胞核的体积。 ①椭球形： 2 V=4nab /3 式中：a——长半径 b——短半径 ②圆球球： 4 2 V= πr 3 式中r——半径 2 ③V= πr h 式中：r——半径 2 h——高度 表1-1 实验结果 细胞名称 形态特征 细胞