中医药研究常用分子生物学技术.ppt

1．后续AA-tRNA与核糖体结合 细菌中肽链延伸的第一步反应：第二个氨基酰-tRNA的结合。 该氨基酰-tRNA首先与EF-Tu ·GTP形成复合物，进入核糖体的A位，水解产生GDP并在EF-Ts的作用下释放GDP并使EF-Tu结合另一分子GTP，进入新一轮循环。 由于EF-Tu只能与fMet-tRNA以外的其他AA-tRNA起反应，所以起始tRNA不会被结合到A位上，mRNA内部的AUG不会被起始tRNA读出，肽链中间不会出现甲酰甲硫氨酸。 2．肽键的生成 细菌中肽链延伸的第二步反应：肽键的生成。 在核糖体·mRNA·AA-tRNA复合物中，AA-tRNA占据A位，fMet-tRNAfMet占据P位。 在肽基转移酶（peptidyl transferase）的催化下，A位上的AA-tRNA转移到P位，与fMet-tRNAfMet上的氨基酸生成肽键。 起始tRNA在完成使命后离开核糖体P位点，A位点准备接受新的AA-tRNA，开始下一轮合成反应。 3. 移位 肽键延伸的最后一步是移位，即核糖体向mRNA 3’端方向移动一个密码子。 细菌中肽链延伸的第三步反应：移位。核糖体通过EF-G介导的GTP水解所提供的能量向mRNA模板3’末端移动一个密码子，使二肽基-tRNA完全进入P位,准备开始新一轮肽链延伸。 肽链的终止 当终止密码子UAA、UAG或UGA出现在