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AAV 病毒包装 摘要 : (一) AAV-293 细胞的冻存 (二)AAV-293 细胞的传代 (三)AAV-293 细胞的复苏 (四)AAV 包装和浓缩 (一) AAV-293 细胞的冻存 随着传代的次数增加， AAV-293 细胞会出现生长状态下降、突变等。为了防止此类现象的出 现，我们需要在开始就对细胞进行大量冻存， 以保证实验的稳定性和持续性。 在细胞对数生 长期进行冻存，增加细胞复苏成活率。 1、去掉 细胞培养上清液，加入 PBS 洗去残留的培养基 ; 2、加入 0.25%的胰酶，消化 1~2min 后，镜下观察细胞变圆，细胞间间隙加大时，去除胰 酶，加入新鲜培养基吹打混匀，移入离心管中。 3、细胞计数，将细胞全部晃下，加入 3mL 37 ℃预热的 10% DMEM，用 10mL 移液管进行 吹打， 较大力吹打 6-8 次即可， 不留死角， 之后， 将所有细胞吸出， 置于 15mL 离心管中， 取 50ul 混匀后的细胞于 1.5mLeppendorf 管中，加入 450ul 10% DMEM ，即为 10 倍稀释， 混匀， 取 10ul 细胞于计数板中计数。 计数板上共 4 大格， 每大格 16 小格。 计数时， 4 大 格均计数，总数除以 4(得每大格细胞数 )，再乘以 10(10 倍稀释 )，即为实际 n 万/mL 细胞 浓度。 4、细胞离心， 1000 rpm/