猪delta-5脂肪酸去饱和酶基因序列与肌内多不饱和脂肪酸含量和生产.doc

豬delta-5脂肪酸去飽和酶基因序列與肌內多不飽和脂肪酸含量和生產性能關係研究 Study on Delta-5 Fatty Acid Desaturase Gene Sequence and Its Association with Intramuscular Polyunsaturated Fatty Acids Content and Production Performances in Pig 研究生：陳婉婷 Chen, Wan-Ting 指導教授：張秀鑾 Chang, Hsiu-Luan 【摘要】 多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid, PUFA）為人類所需之重要營養成分，不僅是細胞膜磷脂質之重要組成物質，且在細胞訊號傳遞上扮演重要角色。哺乳動物delta-5脂肪酸去飽和酶（delta-5 fatty acid desaturase, D5FAD）為一種膜結合去飽和酶，主要功能為參與動物體內PUFA之生合成，進而產生花生四烯酸（arachidonic acid, AA）、eicosapentaenoic acid（EPA）和docosahexaenoic acid（DHA）。研究指出豬肉肌內脂肪酸含量具中高遺傳性（h2估值介於0.20與0.79），其組成分受遺傳（品種和性別）和環境（飼養管理和營養成分）等因素影響，且與人類心血管疾病有關，故歐洲衛生機構建議人類膳食肉類之PUFA (P) 與飽和脂肪酸（saturated fatty acid, S）含量比（PUFA/SFA）應高於0.4，而PUFA中ω-6與ω-3含量比（ω-6/ω-3）則應小於4.0。本研究旨在探討豬隻delta-5脂肪酸去飽和酶基因與其肌內PUFA含量和生產性能之關係。應用聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction）技術進行豬D5FAD基因增殖與定序，獲得長度1,338 bps之全長序列，可轉譯出446個胺基酸；且完成NCBI基因庫註冊與取得EU131180序號（accession number）。經與人類、大鼠和小鼠D5FAD基因序列比對發現，豬與大鼠和小鼠具84% 同源性，而與人類有89% 同源性。分析豬隻八種不同器官組織之D5FAD mRNA表現量結果顯示，肝臟表現量最多，心臟次之。應用D5FAD基因第933與1019個核苷酸之雙變異點（T933C與C1019G），進行肉豬組合基因型分析。結果顯示：閹公豬和女豬以TT-GG基因型者居多（54.20和53.98%），TC-CG型者（28.57和26.11%）次之。基因型效應評估指出，T933C與C1019G突變點分別為TC與GG基因型者，肌內PUFA含量，分別顯著地較同一突變點其他基因型者為高。同時，ω-3含量最低14% 豬隻具T933C-TT基因型之頻率顯著地高於ω-3含量最高14% 豬隻組；但其T933C-TC基因型頻率則顯著地較低。相同趨勢亦見於DPA與DHA含量最高與最低14% 豬隻組之比較。C1019G基因型頻率分布比較發現，GG基因型頻率不論在最高14% ALA或ω-6含量組，均較低含量組者為高。肉豬屠體性狀評估發現，T933C-CC型豬隻有較重之腹脅肉、較高屠體主要部位肉率、瘦肉量、前軀骨骼重與大理石紋評分。同時，C1019G-GG基因型豬隻總骨骼重和前骨骼重均較重。品種內T933C和C1019G基因型豬隻生長性能比較顯示，T933C-CC基因型杜洛克公豬有較佳之飼料效率與較早達110 kg重之傾向，相同趨勢亦見於藍瑞斯公豬。此外，C1019G-CC基因型藍瑞斯公豬有較佳之飼料效率。綜合上述，應用D5FAD基因多態性資訊於豬隻生產體系中，生產健康與優質畜產品，值得進一步評估與探討。 關鍵字：delta-5 脂肪酸去飽和酶、豬、多不飽和脂肪酸、生產性狀 【Abstract】 Long chain polyunsaturated fatty acids (PUFAs) are essential nutrient in human diet, which serves as structural components of cell membranes, and play key roles in cell signal transduction. Delta-5 fatty acid desaturases (D5FAD) of mammals are membrane bound desaturases, which mainly involve in the biosynthesis of PUFAs, and result in AA, EPA and DHA production. Researc