DNA限制性核酸内切酶谱分析.pptxVIP

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2019-06-11 发布于山东
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DNA限制性核酸内切酶谱分析.pptx

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实验二 DNA限制性核酸内切酶谱分析 ;a.识别序列具有特异性：4～6bp，具有回文结构;c.切口特征平端粘性末端 5’ 突出 3’ 突出;;4.影响限制性内切酶活性的因素;c. －20 ℃保存 ,含Mg2+的Tris-HCl缓冲体系，含二硫苏糖醇(DTT)或巯基乙醇(ME一般保存于５０％的甘油中;产生星号活力的原因 ;E.酶的活性单位(1U)：1小时内在50ul容积中降解1ugλDNA所需的酶量;二．操作：１．样品DNA的限制性内切酶消化;37 ℃ 保温1个半小时后加６＊loading buffer 5ul,取20ul上样电泳. ;酶切图谱：(λDNA,48.513Kb) HindIII EcoRI 23.13 21.226 9.416 7.421 6.557 5.814 4.361 5.643 2.322 4.878 2.027 3.53 0.564 0.125;3.结果：