氨基酸药物发酵生产.pptVIP

（3）工艺路线 （4）工艺过程 ①固定化氨基酰化酶的制备 取DEAE-Sephadex A-50（二乙氨基乙基葡聚糖,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克）于去离子水中充分浸泡后，依次用10倍量0.5mol／L HCl和0.5mol／L NaOH溶液搅拌处理30min，再用去离子水洗至中性，然后依次用0.1mol／L及0.01mol／L的pH7.0磷酸缓冲液处理1～2h，滤干备用。 另取培养40～50h的米曲扩大曲用6倍量去离子水分两次抽提，滤去残渣。滤液用2mol／L NaOH溶液调pH6.7~7.0，按100L酶液加1kg已处理的湿DEAE-SephadexA-50的比例混合，于0～4℃搅拌吸附4～5h，滤取DEAE-Sephadex A-50，依次用去离子水、0.1mol／L醋酸钠、0.01mol／L的pH7.0磷酸缓冲液洗涤3～4次，滤干得固定化氨基酰化酶，加1％甲苯后于冷库中贮存，备用。 ②Ac-DL-Phe的制备 将DL-Phe、冰醋酸及醋酸酐按1∶7∶1（w／V／v）的比例加入反应釜中，90℃反应4～5h，回收醋酸，浓缩液加一定量去离子水，再浓缩至一定体积，冷却结晶，滤取结晶于60℃真空干燥得Ac－DL－Phe。 ③酶水解 在1000L反应罐中加700L 0.1mol／L Ac-DL-Phe钠盐溶