重点专题课题酵母细胞固定化.pptVIP

　　如今，酶已经大规模地应用于食品、化工、轻纺、医药等各个领域。在应用酶的过程中，人们发现了一些实际问题：酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。 ;　　于是，有人设想，将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。现代的固定化酶技术已完全实现了这一设想。 高果糖浆的生产就是固定化酶技术成功地应用于工业生产的实例。 ;　　酶是由细胞合成的，于是，又有人设想，能否将合成酶的细胞直接固定?自20世纪70年代，在固定化酶技术的基础上，又发展出了细胞固定化技术。与固定化酶技术相比，固定化细胞制备的成本更低，操作更容易。在本课题中，我们将动手制备固定化酵母细胞，体会固定化酶的作用。;阅读与思考（P49~50） 1、什么是高果糖浆？与蔗糖比有何优点？ 2、解决酶应用中存在不足的技术及方法是？ 3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？ 　 这种酶有何特点？ 4、高果糖浆生产过程？ 5、这种方法的优点是什么？;1、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人的健康更有益。;基础知识 (一)　固定化酶的应用实例;含淀粉的浆液;　　使用固定化酶技术，将葡萄糖异构酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触转化成果糖，从反应柱的下端流出;5优点是： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的 酶可以被反复利用。 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高果糖的产量和质量。;　　使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。目前，用固定化葡萄糖异构酶生；产高果糖浆的规模已经超过了每年1000万吨。 ;1、下列说法不正确的是（ ） 　A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成 的是果糖； 　B、从固定化酶反应柱下端流出的是果糖； 　C、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿 病、龋齿和心血管病； 　D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中回收。;问： 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足？如有不足，怎么办?;基础知识 （二）固定化细胞技术;;基础知识 （二）固定化细胞技术;实验操作;1、酵母细胞的活化;实验操作;3、配制海藻酸钠溶液;4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合;实验操作;（二）用固定化细胞发酵; 海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促进其溶解。溶解海藻酸钠，最好采用小火间断加热的方法。例如，加热几分钟后，从石棉???上取下烧杯冷却片刻，并不断搅拌，再将烧杯放回石棉网继续加热，如此重复数次，直至海藻酸钠完全溶化。如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。 ;（一）观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 （二）观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。; 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。;;练习: