核酸的生物合成-课件.pptVIP

功能： DNA-pol Ⅲ (250kD) 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 1、DNA聚合酶活性 2、?? ? 5? 核酸外切酶活性 核心酶 ?-复合物 ε ε PolIII全酶（二聚体）每一个单体都具有催化活性，一个作用于领头链，另一个作用于随从链，使两股链在同一地方同一时间进行合成。 随从链母链环绕360度，形成局部片断与领头链靠近，沿同一方向进行合成。 （?亚基） （核心酶） 5 （二）常见的真核细胞DNA聚合酶有五种 DNA-pol ? 引物合成，随从链的部分合成。 延长子链的主要酶。 参与低保真度的复制，参与损伤修复。 在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。 在线粒体DNA复制中起催化作用。 DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? DNA-pol ? 解螺旋酶(helicase)　——利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。 引物酶(primase) ——复制起始时催化生成RNA引物的酶。 单链DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB) ——在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。 DnaB DnaG 2ATP/碱基对 10 8 超螺旋局部解开 DNA拓扑异构酶改变DNA超螺旋状态、 理顺DNA链 DNA复制解螺旋时延同一轴反向旋转，DNA分子打结，缠绕。在复制叉前产生正超螺旋。 拓扑异构酶Ⅰ 切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。 反应不需ATP。 拓扑异构酶Ⅱ 切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。 利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 作用机制： 放大超螺旋 放大双螺旋 拓扑异构酶Ⅰ的作用方式 OH3’ P-5’ 拓 扑 酶I 拓扑酶I 切断DNA双链中的一股，使两个螺旋变为一个，适当时候再封闭缺口 DNA解链旋转不致打结 拓扑酶Ⅱ的作用方式： 4、DNA连接酶连接DNA双链中的单链缺口 连接DNA链3?-OH末端和相邻DNA链5?-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。 DNA连接酶(DNA ligase)作用方式： HO 5’ 3’ 3’ 5’ DNA连接酶 ATP ADP 5’ 3’ 5’ 3’ DNA连接酶的作用： DNA连接酶 DNA连接酶在复制中起最后封闭缺口的作用。 在DNA修复、重组中也起封闭缺口作用。 也是基因工程的重要工具酶之一。 功能： （一）复制起始：DNA解链形成引发体 需要解决两个问题： 1. DNA解开成单链，提供模板。 2. 形成引发体，合成引物，提供3?-OH末端。 三、原核生物的DNA复制过程 解链过程 DnaA、B、C三种蛋白参与 DnaB 解螺旋酶 DnaC DnaA蛋白 四个相同亚基组成 识别区 解螺旋酶 DNA解成单链 3? 5? DNA拓扑异构酶 Dna A 含有DnaB（解螺旋酶）、DnaC蛋白、引物酶（DnaG）和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 Dna A 3? 5? Dna B、 Dna C SSB 引物酶 识别区 2.引发体的形成 3? 5? 3? 5? 引物 3 HO 5 引物酶 3. 引物的形成 引物酶 引物是由引物酶催化合成的短链RNA。 引发体的生成 （二）复制的延长过程：领头链连续复制，随从链不连续复制 复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 领头链的合成： 领头链沿着5?→3?方向可以连续地延长。 随从链的合成 同一复制叉上领头链和随从链由相同的DNA-pol催化延长 目录 目录 目录 目录 核酸的生物合成 蛋白质 遗传信息传递的中心法则（central dogma） Francis Crick (1916-2004 ) DNA RNA 复 制 转 录 逆转录 翻 译 ? 1958年 复制(replication)是指遗传物质的传代，以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。 亲代DNA 复制 子代DNA 复制的基本规律 DNA复制的反应体系 复制的过程 逆转录 DNA损伤与修复 复制的方式 ——半保留复制(semi-conservative replication) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) 双向复制(bidirectional replication) 复制的高保真性(high fidelity) 一.复制的基本规律