第十一章RNA的生物合成.pptVIP

11 RNA的生物合成 Chapter 11 RNA Biosynthesis, Transcription;本章重点与难点 重点：掌握RNA生物合成方式、酶类及合成后加工，RNA合成后加工的意义，RNA合成的起始与终止、RNA的复制、核酶。 难点：RNA合成的起始与终止；真核生物RNA转录后加工；核酶。;一、转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录（transcription）。 经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，snRNA和HnRNA等. ;RNA多核苷酸链;复制和转录的区别 ;参与转录的物质;（一）转录模板 ;5′···GCAGTACATGTC ···3′;RNA;5? 3?;转录（transcription）的不对称性就是指以双链DNA中的一条链作为模板进行转录，从而将遗传信息由DNA传递给RNA。 对于不同的基因来说，其转录信息可以存在于两条不同的DNA链上。;RNA;（二)RNA聚合酶;;核心酶 (core enzyme);RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;2、真核生物的RNA聚合酶 ;（三）模板上酶的辨认、结合;开始转录; TATA盒;1）转录起始; 启动子: 模板DNA上RNA pol 结合的部位。 结合位点：以开始转录生成RNA 5’端 第一个核苷酸的位置为1，以负数表示上游的碱基数，正数为下游碱基数。 ;2. DNA双链解开;2）转录延长;转录空泡(transcription bubble)：;;5?;依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;A T P;2. 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;茎环结构使转录终止的机理;（五）真核生物的转录起始;转录起始点;2. 转录因子 ;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ ;3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) ;POL-Ⅱ;2）转录延长;RNA-Pol;5?------AAUAAA-;几种主要的修饰方式;（一）真核生物mRNA的转录后加工;帽子结构;5? pppGp…;2）mRNA的剪接;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;3. 内含子的分类 ;4. mRNA的剪接;②;pG-OH (ppG-OH, pppG-OH);? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。;（二）tRNA的转录后加工;RNAaseP、内切酶;tRNA核苷酸转移酶、连接酶;碱基修饰;（三）rRNA的转录后加工;三、真核生物与原核生物转录的异同点;四、核 酶;核酶 核酸酶是唯一的非蛋白酶。它是一类特殊的RNA，能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应. 1982美国T.Cech和Altman于1989年共获诺贝尔化学奖。 ;四膜虫rRNA内含子的二级结构;最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure);;核酶研究的意义;人工设计的核酶;（1）根据催化反应类型： 剪切酶、剪接酶和多功能酶。 （2）根据酶催化的底物是其本身RNA分??还是其他分子： 分子内催化的R酶：自我剪切酶、自我剪接酶（I型IVS和II型IVS的R酶） 分子间催化的R酶： 　　　作用于其它RNA、DNA、多糖、氨基酸酯的R酶