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HPLC日常维护（二） ——色谱柱的使用和维护 * * 高效液相色谱法(HPLC)基本原理 一、高效液相色谱法与气相色谱法比较 ① 分析对象： 气相色谱法只能分析气体和沸点较低的化合 物； 沸点高、热稳定性差、摩尔质量大的有机 物，主要采用高效液相色谱法进行分离和分 析 ② 流动相作用： 气相色谱法的流动相是惰性气体，仅起运载 作用 高效液相色谱法中流动相不仅起运载作用，还与固定相一起共同完成对组分的分离 ③运行环境： 气相色谱法一般都在较高温度下进行分离和测定，使其应用范围受到了较大的限制。 高效液相色谱一般在室温下进行分离和分析，适于分离分析生物大分子、离子型化合物、不稳定的天然产物和各种高分子化合物如：蛋白质、氨基酸、核酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料、药物等。 ④HPLC除用于分离和分析外，还可用于制备 注意：由于气相色谱更快、更灵敏、更方便而且耗费低，因此凡是能用气相色谱法分析的样品一般不用液相色谱法。 二、高效液相色谱法的类型 高效液相色谱法可以分为： 液液分配色谱法（LLPC） 液固吸附色谱法(LSAC) 离子交换色谱法（IEC） 离子对色谱法（IPC） 离子色谱法（IC） 空间排阻色谱法（SEC） 亲和色谱法（AC） 三、正相色谱法 Normal phase HPLC 正相色谱法的流动相极性小