实验室平菇栽培法 实验报告.docVIP

. . 实验报告 实验名称 实验室平菇栽培法 班组 姓名 学号 日期 成绩 教师签名 实验目的 1.掌握平菇基本栽培方法及其原理。 2.掌握平菇栽培中器械和培养基的灭菌方法及原理，如高压蒸汽灭菌法、干热灭菌、灼烧灭菌和紫外灯灭菌法等。 3.了解食用菌母种扩大繁殖生产的基本原理,掌握斜面母种的接种和培养方法。 4.掌握平菇栽培中原种、栽培种培养基的制备方法。 5.培养学生自行设计出菇的方案。 基本原理 1.平菇是木质腐生菌，生长发育所需各种营养物质均从木屑、棉籽壳、稻草等培养料中获得。平菇生长周期短，从播种到第一批采收一般为30天到40天，栽培方法简便，成功率高。本实验在实验室条件下，用袋装方法出菇。 2.食用菌生产中，培养基、器皿及接种工具的消毒灭菌，是防止杂菌污染，提高食用菌产量的关键措施，灭菌和消毒法主要有物理方法（高温灭菌和紫外线灭菌）、化学灭菌法。 干热灭菌是在保持恒温的电烘箱中进行的,适用于各种耐热的玻璃器皿、棉塞、滤纸、以及不能与蒸汽充分接触的液体的灭菌.一般在160摄氏度持续1.5—2小时,就可达到灭菌的目的.灼烧灭菌可直接在酒精灯外火焰灼烧灭菌,酒精灯所用的酒精浓度要在百分之95以上. 紫外灯灭菌是接种室(箱)最常用的方法之一,每次在使用前开灯20—30分钟.紫外线可导致细胞内核酸和酶发生变化而使细胞死亡,还可使空气中氧气产生臭氧,臭氧也具有杀菌作用.因其透射力差只适用于空气及物体表面的灭菌,有效距离为1.5—2米,以1.2米内为最好. 3.食用菌母种培养基和分离菌种时用斜面培养基，适用于一般食用菌的母种分离与培养用的培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基（即PDA培养基），配成后用加压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。 4.食用菌菌种生产一般按母种——原种——栽培种进行。母种数量少，要进行试管移接扩大培养才能进行生产。 5.原种由母种繁殖而成，由原种扩大培养成栽培种。原种和栽培种生产一般包括配料——装瓶（袋）——灭菌——接种——培养等流程。一般用瓶装或塑料袋装，灭菌压力和时间相应延长。 实验器材 1.材料：马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、75%乙醇溶液、麦粒、棉籽壳、石膏粉、碳酸钙、麦麸 2.器具：锥形瓶、棉塞、超净工作台、烧杯、量筒、漏斗、天平、铁架台、纱布、药匙、PH实纸、接种铲、酒精灯、聚丙烯塑料袋、小试管、牛皮纸、高压蒸汽灭菌锅等 实验过程 1、10月7日 ①准备干净的一只试管和一个锥形瓶，贴上标签并制作两个与试管和锥形瓶相配套的棉塞。 ②配置PDA培养基： 马铃薯（去皮） 2500克 葡萄糖 250克 琼脂 250克 水 12500克 自然PH值 按上述配料加，用小火加热并用搅拌器不断搅拌。 ③分装：将培养基在凝固前进行分装，一般到试管的1/5至1/4左右，分装完后加塞用牛皮纸包扎好。 ④灭菌：用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌。 打开灭菌锅盖，向锅内加入适量的水。将待灭菌物品放入锅内，然后价盖旋紧螺旋，使蒸气锅密闭； 打开放气阀加热。自开始产生蒸汽后10分钟左右关紧放气阀让温度随蒸汽压力增高而上升，最后在115℃下，维持30分钟。 停止加热，待压力降至5磅以下时，放气，打开锅盖，取出灭菌物。 ⑤ 制试管斜面：灭菌完毕降至60摄氏度后取出试管摆斜面，是斜面为试管长度的1/2。 ⑥无菌检查：将斜面培养基放置于37摄氏度温箱内，培养24小时，若无菌长出，可存备用。 2、10月14日： ①超净台提前擦干净,紫外灯杀菌,通风打开10分钟后可以操作; ②接种菌丝型平菇母种扩大培养： 左手持试管，右手持接种工具，拔去棉塞后用酒精灯封住管口 将母种用接种铲切成0.5厘米宽长条，深度约占培养基2/3，再用接种锄切成宽0.5厘米的正方形小块接种到空白试管中央，菌丝面朝上,使之紧贴于培养基斜面上。 置于25℃至27℃恒温箱中培养，当菌种块上菌丝萌发后可将温度降至2到3℃。当菌丝长至斜面培养基长度的4/5时可停止培养放恒温箱中培养。 3、10月21日： ①配制麦粒培养基（即原种培养基）： 麦粒 2500克 蔗糖 62.5克 碳酸钙 62.5克 水 6250克 ②将麦粒培养基装到锥形瓶中（约占锥形瓶的一半，不可太满），加棉塞包扎后灭菌，灭菌条件一般采用1.4公斤/平方厘米，1.5—2.0小时。 4、10月28日： ①原种接种：在超净工作台上，取斜面母种，切取2.5平方厘米