DB13 t 1080-2009 乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定.pdfVIP

ICS67.100 X 16 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB13/T 1080-2009 乳及乳制品中p一内酞胺酶的测定 Detectionof3(-lactamasesinmilkandmilkproducts 2009-05-27发布 2009-06-11实施 河 AL省 质 RIP技 术 11/-I-督 局 发 布 免费标准网() 无需注册 即可下载 免费标准网() 无需注册 即可下载 DB13/T1080-2009 .舀L .J.目 月U 青 本标准的附录A和附录C为规范性附录，附录B为资料性附录。 本标准由河北省质量技术监督局提出并归口。 本标准第一法由河北省食品质量监督检验研究院起草。 本标准第二法由河北省食品质量监督检验研究院起草。 本标准第三法由河北省科学院生物所起草。 本标准第一法主要起草人:周正、周巍、李丛芬、穆燕魁、张岩。 本标准第二法主要起草人:李挥、张敬轩、庞坤、范斌、张岩。 本标准第三法主要起草人:闰静辉、陈英珠、昊萌、程华、李春生、张小兵、董超、李亚璞。 免费标准网() 无需注册 即可下载 免费标准网() 无需注册 即可下载 DB13/T 1080-2009 乳及乳制品中p一内酞胺酶的测定 第一法 杯碟法 1 范围 本标准规定了乳及乳制品中R一内酞胺酶的检验方法一杯碟法。 本标准适用于生鲜乳、巴氏杀菌乳及灭菌乳中具有活性且对舒巴坦敏感的卜内酞胺酶的检验。 木方法的检出限为4U/:nLo 2 原理 该方法采用对青霉素类药物绝对敏感的标准菌株，利用舒巴坦特异性抑制p一内酞胺酶的活性，并 以青霉素作为指示物，通过比对加人R一内酞胺酶抑制剂与未加人抑制剂的样品所产生的抑菌圈的大小 来间接测定样品中的R一内酞胺酶。 3 设备和材料 3.1 抑菌圈测量仪或测量尺。 3.2 恒温培养箱:36℃土19Co 3.3 高压灭菌器。 3.4 无菌培养皿:内径90mm，具陶瓦盖。 3.5 无菌牛津杯:外径 (8.0土0.1)mm，内径 (6.0土0.1)mm，高度 (10.010.1)mm, 3.6 麦氏比浊仪或标准比浊管。 3.7 无菌吸管:1mL(0.01mL刻度值)，10mL(0.1mL刻度值)。 3.8 加样器:55L^205L,205L-2005L及配套吸头。 4 培养基和试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的三级水。 4.1试验菌种:藤黄微球菌 (Micrococcusluteus,CMCC(B)28001)，使用菌株代数3-14代。 4.2 磷酸盐缓冲溶液:按附录A中A.1规定。 4.3生理盐水 (8.5g/L):按附录A中A.2规定。 4.4 青霉素标准溶液:按附录A中A.3规定。 4.5 3(一内酞胺酶标准溶液:按附录A中A.4规定。 4.6 舒巴坦标准溶液按附录A中A.5规定。 4.7 营养琼脂培养基:按附录A中A.6规定。 4.8 抗生素检测用培养基II:按附录A中A.7规定。 4.9 空白牛奶 :按附录A中A.8规定 5 操作步骤 5.1 菌悬液的制备 将藤黄微球菌接种于营养琼脂斜面上，经3611℃培养 18h^-22h，用无菌生理盐水洗下菌苔即为 免费标准网() 无需注册 即可下载 DB13/T 1080-2009 菌悬液，测定菌悬液浓度，终浓度应大于1X1010CFU/mL,4℃保存，贮存期限2周。