BJS201805食品中那非类物质的测定.docVIP

—— PAGE 2 — — PAGE 1 —— 附件 食品中那非类物质的测定 （BJS 201805） 1 范围 本标准规定了食品（含保健食品）基质中90种那非类物质的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。 标准中方法一超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的定性和定量测定。 标准中方法二超高效液相色谱-串联高分辨质谱法，适用于饮料、果冻、蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、酒类及咖啡等食品（含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊、软胶囊等剂型）中90种那非类物质的筛查和定性确证。 方法一 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法 2原理 试样经甲醇超声提取，过滤后，滤液供超高效液相色谱—三重四极杆串联质谱仪测定，外标法定量。 3试剂和材料 注：水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。 3.1.2 甲酸（HCOOH）：质谱级。 3.1.3 乙酸乙酯（C4H8O2）：分析纯。 3.1.4 盐酸（HCl）：分析纯。 3.2 试剂配制 3.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（4.3）过滤后备用。 3.2.2 盐酸甲醇溶液（1+99）：取盐酸1mL用甲醇稀释至100mL。 3.2.3 甲醇水溶液（1+1）：将甲醇与水等体积混合。 3.3 标准品 西地那非等90种物质标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1标准储备液（200 μg/mL）：分别精密称取Lodenafil carbonate（46罗地那非碳酸酯）、Sildenafil dimer impurity（63西地那非二聚体杂质）、Vardenafil dimer（69伐地那非二聚体）标准品（3.3）各10mg，用盐酸甲醇溶液（1+99）溶解并稀释至50mL，摇匀；分别精密称取其余87种标准品（3.3）各10 mg，用甲醇溶解并稀释至50mL，摇匀，制成浓度为200 μg/mL标准储备液。-20 ℃避光贮存，有效期3个月。 3.4.2 混合标准中间工作溶液（1 μg/mL）：分别准确吸取标准储备液（200 μg/mL）（3.4.1）各0.1 mL， 用甲醇稀释至20mL，摇匀，制成1 μg/mL的混合标准工作溶液。临用新制。根据化合物保留时间适当分组。 3.4.3 混合标准工作溶液：分别准确吸取混合标准中间工作液（1 μg/mL）（3.4.2）适量，用甲醇水溶液（1+1）（3.2.3）稀释，摇匀，作为系列混合标准工作溶液，浓度依次为各化合物2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L，临用新制或依仪器响应情况配制适当浓度的混合标准工作溶液。或根据需要采用空白基质提取液（5.1.4），配制适当浓度的基质混合标准工作溶液。 4 仪器和设备 4.1高效液相色谱-串联质谱仪，配电喷雾（ESI）离子源。 4.2天平：感量分别为0.01 mg和0.1 mg。 4.3微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 离心机：转速≥4 000 r/min。 4.5 超声波清洗器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 固态或半固态试样 取固态试样（蛋白粉、牡蛎粉、饼干、糖果、咖啡及含与上述基质相同的保健食品及片剂、胶囊等剂型）适量混匀，研细，或取半固态试样（果冻）适量混匀，精密称取1g（精确至0.001 g）置于50 mL容量瓶中，加甲醇（3.1.1）适量，超声提取15 min，放冷至室温，用甲醇（3.1.1）定容，转移至50 mL离心管中，4 000 r/min离心5 min，上清液经微孔滤膜过滤（4.3），取续滤液，根据实际浓度用甲醇水溶液（1+1）（3.2.3）适当稀释至线性范围内，备用。 5.1.2 液态试样 取试样（饮料、酒）适量摇匀，准确吸取1mL置于50 mL容量瓶中，加甲醇（3.1.1）适量，超声提取15 min，放冷至室温，用甲醇（3.1.1）定容，经微孔滤膜（4.3）过滤，取续滤液，根据实际浓度用甲醇水溶液（1+1）（3.2.3）适当稀释至线性范围内，备用。 5.1.3 油脂基质（软胶囊）试样 取试样（软胶囊）适量混匀，精密称取1g（精确至0.001 g）置于50 mL容量瓶中，加乙酸乙酯5mL，振摇，使其分散，加甲醇（3.1.1）适量，超声提取15 min，放冷至室温，用甲醇（3.1.1）定容，转移至50 mL离心管中，4 000 r/min离心5 min，上清液经微孔滤膜过滤（4.3），取续滤液，根据实际浓度用甲醇水溶液（1+1）（3.2.3）适当稀释