化妆品中氯苯甘醚的检测方法.doc

PAGE 10 - 附件9： 化妆品中氯苯甘醚的检测方法 （征求意见稿） 1 适用范围 本方法规定了测定液体类、膏霜乳类、固体粉类化妆品中氯苯甘醚的高效液相色谱法。 本方法适用于液体类、膏霜乳类、固体粉类化妆品中氯苯甘醚的含量测定。 本方法中氯苯甘醚的检出限为3ng、定量下限为10ng；取0.5g样品时的检出浓度为6?g/g， 2 方法提要 氯苯甘醚在280nm处有特征吸收，可用高效液相色谱分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。 3 试剂 水为一级实验用水。 3.1 甲醇，色谱纯。 3.2 氯苯甘醚，对照品，纯度99.5%。 3.3 标准溶液（?＝1000mg/L）：称取氯苯甘醚约0.05g（精确到0.0001g）于小烧杯中，加入甲醇，超声溶解后转移至50mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，配成浓度约 3.4 标准溶液（?＝50mg/L）：移取标准溶液（3.3）5.00mL至100mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，配成浓度约为50mg/L的标准溶液。 3.5 标准系列：分别移取氯苯甘醚标准溶液（3.4）0.20mL、1.00mL、2.00mL、10.0mL和标准溶液（3.3）1.00mL 、2.50mL、5.00mL于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。此时溶液中组分的浓度分别为 1 mg/L、5 mg/L、10mg/L、50 mg/L、100 mg/L、250 mg/L和500 mg/L。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪，具有二极管阵列检测器，配色谱工作站。 4.2 超声波清洗器。 4.3 离心机。 4.4 天平，感量0.0001g。 5 分析步骤 5.1 样品预处理 称取样品约0.5g（精确至0.0001g）于10mL具塞比色管中，加入少量流动相，涡旋振摇1min，补流动相至刻度，超声提取30min，浑浊样品需 5.2 测定 5.2.1 色谱参考条件 色谱柱： C18 柱（250mm×4.6mm，5?m 流动相：甲醇+水=55+45； 流速：1.0mL/min； 检测器：二极管阵列检测器，检测波长为280nm。 柱温：25℃ 5.2.2 校准曲线的制备 在设定色谱条件下，分别取氯苯甘醚标准系列（3.5）10? 5.2.3 样品测定 在设定色谱条件下，进10?L待测样液进行高效液相色谱分析。色谱图检出的物质，经与该物质对照品的保留时间和紫外光谱图比较确证后，根据峰面积，从校准曲线上获取相应组分的质量浓度。若待测溶液中 6 平行实验 按步骤5.2，做两份样品的平行测定。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10%。 7 计算 D ? ? ? V w（氯苯甘醚）= —————— ×10-4 m 式中：w（氯苯甘醚）——化妆品中氯苯甘醚的质量分数，%； ? —— 从校准曲线上查得的待测溶液中氯苯甘醚的质量浓度，mg/L； V —— 样品定容体积，mL； m —— 样品用量，g； D —— 稀释倍数（不稀释则取1）。 8 回收率和精密度 经多家实验室验证，氯苯甘醚的方法加标回收率在85%～105%之间，相对标准偏差在0.2%～2.2%之间。 9 色谱图 图1 氯苯甘醚标准溶液色谱图(7.116min) 化妆品中氯苯甘醚的检测方法起草说明 为进一步完善化妆品中禁用和限用物质检测方法标准体系，加强化妆品中禁用和限用物质的监督管理，国家食品药品监督管理局于2012年6月委托中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所开展化妆品中氯苯甘醚检测方法的建立工作，现就起草工作有关情况说明如下： 1 起草的必要性 氯苯甘醚对真菌和细菌具有广谱的抗菌作用，常常在化妆品中作为防腐剂使用。近年来在全球范围内屡有文献报道消费者因为使用含有氯苯甘醚的化妆品而引发皮炎。氯苯甘醚还可使骨骼肌松弛，抑制中枢神经系统并引起呼吸困难。在我国，氯苯甘醚作为限用防腐剂使用，鉴于由其引发的各种健康安全问题，加强监管非常重要。关于氯苯甘醚的检测方法，早期的国外文献中有报道使用气相色谱法、光谱法。近年来的文献报道多使用液相色谱法，但资料不多。目前国内有研究使用液相色谱法检测药品中的氯苯甘醚，还未见化妆品中氯苯甘醚检测方法的文献报道。因此，建立化妆品中氯苯甘醚的检测方法，对维护消费者的健康权益具有重要意义。 2 起草依据及文献 （1）《化妆品卫生规范》（2007年版） （2）化妆品及其原料中禁限用物质检测方法验证技术规范 （3）Eunyoung Lee, Susun An, etc. Comparison