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- 2019-06-17 发布于四川
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- | 2008-08-22 颁布
- | 2008-12-01 实施
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ICS 11.220
B 41
中华人民共和国国家标准
GB/T 22332—2008
鸭病毒性肠炎诊断技术
Diagnostic techniques for duck virus enteritis
2008-08-22 发布 2008-12-01 实施
发布
GB/T 22332—2008
刖
本标准部分技术采用 ()IE 《陆生动物诊断试验和疫苗手册M2004)推荐的试验方法,并把具体操作
程序予以细化。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:华南农业大学、中华人民共和国广东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:郭霄峰、廖明、洪洁心。
T
GB/T 22332—2008
鸭病毒性肠炎诊断技术
1范围
本标准规定了鸭病毒性肠炎病毒(DVEV)分离和鉴定及聚合酶链式反应(PCR)试验的诊断技术
要求。
本标准适用于鸭病毒性肠炎的诊断。
2临床症状和病理变化
家养的鸭和雏鸭从7日龄至成年均可感染发病。在易感鸭群,初始症状通常为突发持续性高死亡
现象,产蛋量明显下降 。由于感染禽的品种、年龄、性别以及病毒毒力的不同 ,暴发鸭病毒性肠炎
(DVE)后临床症状、剖检病变有很大的差异 。种鸭临床症状为流泪、怕光、烦渴、缺乏食欲、共济失调、
水样腹泻和流鼻液 。通常病鸭羽毛蓬乱,肛门粘有污物 。病鸭借助翅膀支撑方能保持平衡,整个外观虚
弱、精神沉郁 。但2周〜7周龄鸭中损失比成鸭低,其症状为脱水、体重下降 ,喙呈蓝色,肛门染有血迹。
剖检时发现,死亡的鸭并不消瘦 。性成熟的公鸭的阴茎可能脱垂 。性成熟母禽的卵巢滤泡出血。
特征性大体病变以血管受损,带有组织出血和体腔游离血液,消化道粘膜表面有环状出血和白喉样损
坏,淋巴样器官受损,实质器官呈退行性病变为特征 。白色北京鸭的特征性病变是血管及内脏器官损
伤,消化道上皮细胞出现嗜酸性核内包涵体和胞浆内包涵体。
3病毒分离
3. 1材料准备
3.1.1病料的采集:一般应在感染初期或发病急性期从濒死期禽或活禽采取 。濒死期禽采集肝、脾、脑
等组织样品 。活禽用灭菌的棉拭子涂抹泄殖腔 。带有分泌物的棉拭子放入每毫升含有1 000 IU青霉
素,1 000陆链霉素,pH7. 2〜7. 6的磷酸盐缓冲液(PBS) 中 。送检病料应置于50%的甘油生理盐
水中。
3. 1.2病料的保存:采集的样品若在48 h内处理,可于4 °C保存;否则应放一20 C以下保存(一70 C
贮存最好)。
3. 1.3病料的处理:将棉拭子充分捻动、拧干后除去拭子 。样品液经3 000 r/min 4 C离心30 min,取
上清液作为接种材料 。组织样品先用pH7. 2-7. 6的PBS制成5倍〜10倍乳剂,3 000 r/min 4 C离心
30 min,取上清液作为接种材料 。为防止细菌污染,可在样品液中加入青霉素(1 000lU/mL),链霉素
(1 000 pig/inL),卡那霉索 (1 000 ptg/mL) ,37 °C温箱中作用30 mino进行无菌检验。
3. 1.4鸭胚:10 0~11日龄的非DVE疫苗免疫鸭胚。
3.2实验操作
3.2.1胚胎接种:取经处理并且无菌检验合格的样品,以0.2 mL/胚的量经绒毛尿囊膜接种10日〜
11日龄的非DVE疫苗免疫的鸭胚,每个样品接种4个〜5个胚 ,于38 C〜38. 5 C恒温箱中孵育。
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