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多功能酶标仪基本操作规程
一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法
1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。
2、再打开电脑开关。(注意,一定要先开仪器,后开电脑,以免仪器连接出现问题。)
3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。
4、仪器自检后,酶标板托架自动伸出(注意仪器前部不要放置物品,以免档住托架的伸出)。将酶标板按数字正确的方向(A1位于左上角)放在托架上。
5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标,酶标板将自动进入仪器中。(注意:千万不要用手将酶标板推入仪器,造成仪器损坏)。
6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。
7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。
8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中,对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定,一般情况下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔,平底,透明板)。(注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板)如果板要加盖子,就要再选中Plate with cover。
9、在Measurements 栏内双击Absorbance ,出现Absorbance的对话框。
10、在Absorbance的对话框中:
⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值;Reference项,在需要扣除背景波长时选中并输入背景波长值。一般情况不选.
⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选
⑶ 在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10;Settle time(使平静时间)项 对于96或384孔板 一般选0;对于其他孔数的板可考虑输入适当的值;孔数越少的板,Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。
⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名;也可不设置。
11、在Part of plate 栏中,用鼠标左键拉框,选择要测定的样品孔(使待测定的样品孔变为黄色),(注意:待测孔只可横向或纵向连续选择,不可以被间断)。如果选择错误需要更改,不要做任何删除,只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后,点击OK,(如果选孔有错误,选择Cancel 返回上页再重复以上操作。)
12、点击OK后,箭头变绿,点击绿色箭头,在Measurement 的workspace处输入(日、月、年-自定义文件名wsp)再点击Start,仪器开始自动测定。
13、测定结束后,点击File 选择print,直接打印测定参数与结果,或在最上方Edit选择Copy to Excel,然后打开下方出现的Excel表(显示为板式数据)并打印结果。
14、关机,退出当前界面,点击左下角 Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑,关仪器电源和插板电源。
二、荧光值的直接测定方法
1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。
2、再打开电脑开关。(注意,一定要先开仪器,后开电脑,以免仪器连接出现问题。)
3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。
4、仪器自检后,酶标板托架自动伸出(注意仪器前部不要放置物品,以免档住托架的伸出)。将酶标板按数字正确的方向(A1位于左上角)放在托架上。
5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标,酶标板将自动进入仪器中。(注意:千万不要用手将酶标板推入仪器,造成仪器损坏)。
6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。
7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。
8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中,对板的类型进行选择。荧光酶标的测定,一般情况下选xxxxx xx Flat black (x孔,平底,黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。(注意在选择底部测定时模式时要选择底部透明的黑板) 如果板要加盖子,就要再选中Plate with cover。
9、在Measurements 栏内双击Fluorescence Intensity ,出现Fluorescence Intensity的对话框。
10、在Fluorescence Intensity的对话框中:
⑴ 在Wavelength栏中:Excitation项输入激发波长值;Emission项输入发射波长值
⑵ 在Mode栏:根据被测物质的性质进行适当选择。
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