骨组织工程产品发展的现状与展望.docVIP

骨组织工程产品发展的现状与展望 许建中 第三军医大学组织工程研究与开发中心 第三军医大学附属西南医院骨科，全军矫形外科中心 重庆 400038 自从1987年组织工程概念提出以来，这一材料学、细胞生物学以及工程学等多学科交叉的新兴学科得到了迅猛的发展，其“通过将活细胞接种于生物支架材料后再移植体内用以实现修复和替代缺损组织”的理念已经在骨、软骨和皮肤等组织修复重建方面取得了显著的效果，并且国外已有软骨和皮肤的相关产品问世。对于骨组织工程而言，目前仍主要停留在应用基础研究层面，规模化成熟的临床应用产品未见报道。国外只有零星的临床应用报道；在国内，上海第二医科大学通过将自体的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）成骨诱导后接种于部分脱钙骨构建组织工程骨用于修复颅骨和颌面骨缺损，取得了良好效果[1]，四川大学用异体骨膜来源的成骨细胞复合生物支架构建组织工程骨治疗多个部位的骨缺损和骨不连，也获得了较好的修复重建效果[2]。本课题组在国家“863”计划滚动资助下，致力于研究解决长骨骨干大段骨缺损的修复重建问题，目前已经取得了初步的成果[3]，现结合国内外的骨组织工程的发展现状，谈一点我们在这方面工作的体会。 1 制备适用于临床的骨组织工程产品的迫切性 严重创伤、肿瘤切除、骨感染等原因所致的骨缺损十分常见，而脊柱融合、人工假体置换等对骨移植材料的需求量也非常巨大。自体骨移植是目前临床治疗骨缺损较有效的方法,但来源有限且会造成供区新的创伤，对病人造成新的生理和心理创伤；珊瑚、β-TCP或高分子材料等人工替代材料分别在生物相容性、生物活性、生物降解性以及与宿主骨的力学匹配性等方面存在短期内难以克服的不足，单独使用暂且很难成为主流的治疗手段[4,5]。目前，同种异体骨以较好的骨传导性成为目前临床上最主要的骨移植材料[6]，在欧美国家其用量仅次于血液，成为使用量第二大的移植组织。我国在骨组织库建设方面也取得了可喜的进步，目前已经建立起包括本单位在内的规范性骨组织库近十个。 但是，异体骨为了降低免疫原性，在处理过程中除去了细胞成分因而丧失了直接成骨活性，导致成骨能力下降及较高的骨不连发生率。近年来，组织工程学通过种子细胞体外扩增并复合于支架材料构建有生物活性的骨移植物，弥补了单纯异体骨无直接成骨活性的不足，在大型哺乳动物实验已经取得了良好的修复重建效果[4,5]。目前，包括本单位在内的数家单位也已成功将自体细胞来源的组织工程骨初步应用于临床，我们通过应用自体MSCs接种于同种异体脱钙骨基质材料上构建组织工程骨修复长骨骨干缺损，取得了较好的疗效。但是，如要满足临床的各种需求尚有一些问题迫切需要解决。 2 制约骨组织工程产品规模化应用的瓶颈 目前，组织工程骨修复骨缺损无论是大型哺乳动物实验还是临床少量的“个体化”应用，都取得了令人振奋的结果[1-5]，已经成为修复重建骨缺损最有希望的治疗策略之一。但是，作为组织工程三大要素的种子细胞、支架材料和构建技术仍然存在各种问题，在目前的情况下难以满足骨组织工程产品规模化应用的要求，成为制约其广泛应用的瓶颈。 2.1 种子细胞 种子细胞作为组织工程的活性成分的主要来源对于组织工程产品的修复重建效果的好坏起着举足轻重的作用。规模化骨组织工程产品对于种子细胞具有两点要求：一是具有优良的增殖和分化潜能，利于大量扩增和诱导分化为成骨细胞；二是移植到宿主体内不引起移植排斥反应和致瘤。目前，应用于骨组织工程的种子细胞主要有以下三种：胚胎干细胞、成体干细胞以及成骨细胞。这三类细胞又可根据供者不同，分为自体来源和同种异体来源两种。目前用于骨组织工程研究的胚胎干细胞均为同种异体来源的，其具有很高的增殖潜能，体外可近乎无限扩增，可以很好满足骨组织工程对于种子细胞数量的需求；但是，如何有效的将其诱导分化为骨组织工程需要的成骨细胞，目前还有大量的问题需要解决和探索，此外，其体内移植后的免疫排斥反应和致瘤性也不容忽视[7,8]。成体干细胞主要是MSCs，有骨髓来源的、脂肪来源的和脐血来源的等。骨髓来源的细胞研究和应用的最早，成骨效果较好，因而被视为“金标准”[9]。其余来源的MSCs，由于近年来刚被分离和研究，具体结果还有待进一步的观察和比较。所有的成体干细胞均为来源于成熟组织内的限定干细胞，因而其增殖和分化潜能是有限的，随着年龄的增加而逐渐降低[10-12]，这就决定了其数量扩增必然存在一定的限度，难以满足作为规模化生产的骨组织工程产品的需要。此外，同种异体来源的MSCs免疫原性不可忽视，虽然亦有报道阐述其免疫原性低并可能具有一定的免疫调节功能[13,14]，以及少量的动物应用研究报道[15]，但其最终效果的评价还有待长期观察和相关基础研究的跟进。自体来源的MSCs虽然免疫问题不必考虑，但是高年龄是限制