头孢菌素终稿.pptVIP

头孢菌素 主讲人：赵静 目录 头孢菌素C 2 概述 1 生物合成 菌种的选育与保存 发酵调控 （一）概述 头孢菌素化合物最初是于1945年，由意大利科学家Giuseppe Brotzu从萨丁岛排水沟中的顶头孢提炼出来。他发现这些顶头孢分泌出一些物质，可以有效抵抗引致伤寒的伤寒杆菌。牛津大学成功提炼出对β内醘胺酶稳定的头孢菌素C，本类药可破坏细菌的细胞壁，并在繁殖期杀菌。对细菌的选择作用强，而对人几乎没有毒性，具有抗菌谱广、抗菌作用强、耐青霉素酶、过敏反应较青霉素类少见等优点。所以是一类高效、低毒、临床广泛应用的重要抗生素。 （二）头孢菌素C 头孢菌素类和青霉素类同属β -内酰胺抗生素，不同的是头孢菌素类的母核是7-氨基头孢烷酸(7-ACA),而青霉素的母核则是6-氨基青霉烷酸，这一结构上的差异使头孢菌素能耐受青霉素酶 头孢菌素C的化学结构 1.菌种的选育与保存 发酵实现高产的首要条件之一是有一株优良菌株。顶头孢霉M8650是用于工业生产的原始亲株，全世界所有的高产菌株差不多都是由他反复诱变、筛选得到的。为了调高产生突变株的概率，可以定向筛选耐受毒性前体或产物的菌株、耐受前体类似物从而能过量合成生物合成中间体的菌株、耐受金属离子的菌株、营养缺陷回复突变菌株、对分解代谢阻遏脱敏的菌株等。例如，蛋氨酸的有毒类似物硒蛋氨酸，能与生物合成中间体或β-内酰胺环本身翻译的金属离子，Hg2+、Cu2+等，都可以作为这种诱变筛选的效应剂 2.生物合成 已通过放射性标记化合物证实，头孢菌素C和青霉素相似；也是以L-α-氨基己二酸、L-半胱氨酸和L-颉氨酸三种氨基酸作为前体经三肽中间体（LLD-ACV），生物合成得到. 首先由三肽中间体（LLD-ACV）生成异青霉素N，然后经差向异构酶转化成青霉素N,并通过阔环酶系生成脱乙酰氧头孢菌素C(DOCPC)，再羟化为脱乙酰头孢菌素C（DCPC）,最后在乙酰辅酶A的存在下，有乙酰基转移酶催化生成头孢菌素C（头C） 3.发酵调控 （1）培养基 氮源：玉米浆、花生粉饼、硫酸铵、尿素 碳源：葡萄糖、糊精、淀粉、植物油 无机盐：Mg2+、PO43-等 【注意事项】对于某些不能利用硫酸根的菌株来说，必须加入蛋氨酸 （2）通气和搅拌 在发酵过程中保证足够的供氧，给以良好的通气搅拌，以维持头C合成的关键——扩环和羟化的需要。 为了维持所需的溶氧浓度，一般要求搅拌输入功率为4kW/m3（发酵液）以上 （3）菌丝形态 在头C发酵过程中产生菌顶头孢霉菌呈现明显的形态分化。在发酵初期的细胞形态，主要为细长、放射形、表面光滑的长菌丝，随着时间的延长，一些菌丝分化、膨胀并断裂为不规则的膨胀菌丝碎片，再演变成球形或椭圆形的单细胞节孢子，当这种膨胀的菌丝碎片在培养液中占优势时则开始大量合成头孢菌素C。研究表明，在菌株选育过程中，随着菌株生产能力的提高，形成节孢子的能力呈增加的趋势 （4）发酵终点 发酵重点由产率、产物组成、成本、效益、过滤速度等综合因素来决定 头孢菌素C是不稳定的化合物，在发酵过程能够中，分子内的β-内酰胺环以5×10-3/m3的一级反应速率非酶降解，故随着发酵液中头孢菌素C浓度的提高，绝对降解量逐渐增加。同时，由于乙酰酯酶的存在，部分头孢菌素C被转化为脱乙酰头孢菌素C，而且后者比前者稳定，因而后者占发酵总产物的比例越来越高。β-内酰胺环降解后的产物及脱乙酰头孢菌素C含量的增加，将对头孢菌素C的回收造成不利的影响。另外，随着发酵时间的延长，由于菌丝的邢台变化及自溶，发酵液将变得难于过滤。因此，应当更具以上各方面的情况，从生产的整体综合考虑，适时地把握发酵终点，以达到最大的生产效率 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *