水稻条斑病菌hrcQ基因的功能以与hrpG在稻黄单胞菌两个致病变种中的互置性.pdfVIP

水稻条斑病菌hrcO基因的功能以及hrp6在稻黄单胞菌两个致病变种中的互置性 1．11 1．12Western 1．14 Western检测HrcQ的分泌性…………………………………………………………．．57 1．15酵母双杂交系统………………………………………………………………………．．58 2结果………………………………………………………………………………………………58 2．1hrcQ是Xoc在非寄主上过敏性反应和寄主上致病性所必需的………………………58 2．2hrcQ基因受水稻细胞诱导表达…………………………………………………………6l 2．3HrcQ不通过T3SS进行分泌……………………………………………………………6l 2A HreQ对水稻条斑病菌T3SS形成和T3SS效应分子的分泌具有重要影响………………．62 3讨论………………………………………………………………………………………………64 第四章水稻黄单胞病菌hrpG和hrpX基因功能互置的研究………………………………………67 1材料和方法………………………………………………………………………………………68 1．1供试菌株和质粒…………………………………………………………………………．．68 1．2植物材料…………………………………………………………………………………一69 13主要试剂、引物合成及相关仪器…………………………………………………………70 1．4培养基……………………………………………………………………………………．7l 1．5水稻黄单胞菌hrpG和hrpX功能互置菌株的构建………………………………………．7l 1．6 1．7 1．8Western 1．9胞外酶类测定……………………………………………………………………………．．74 2结果……………………………………………………………………………………………………………………………。74 2．1水稻黄单胞菌hrp6和hrpX功能互置菌株的构建………………………………………．74 2．2水稻黄单胞菌hrpC和hrpX功能互置菌株的表型测定…………………………………一75 2．3RT-PCR检测l}l巾G功能互置菌株中候选hrp基因的表达…………………………………79 2．4水稻黄单胞菌hrpG和hrpX功能互置菌株的胞外酶活性测定……………………………79 3结论与讨论………………………………………………………………………………………80 全文结论…………………………………………………………………………………………………83 参考文献…………………………………………………………………………………………………85 攻读硕士学位期间发表的文章………………………………………………………………………．101 至|【谢…………………………………………………………………………………………………………………………………。103 摘要 两个致病变种中的互置性 摘 要 水稻条斑病菌(Xanthomonasoryzae 细菌，侵染水稻引起细菌性条斑病(bacterial 水稻上的重要细菌病害。水稻条斑病菌的hrcQ基因在动植物病原细菌中高度保守。 不同植物病原细菌的nreQ蛋白因在N端有变化，推测可能与分泌的效应分子特异性 IIIsecretion 有关。水稻条斑病菌HrcQ蛋白对III型分泌装置的(typesystem，T3SS)形 成以及对效应分子的分泌性影响还不清楚。本研究利用同源重组方式获得了水稻条斑 病菌hrcQ基因的敲除突变体，其丧失了在烟草上激发过敏反应(HR)的能力和在水 稻上的致病性。hrcQ基因与水稻细胞互作时受诱导表达。蛋白质．蛋白质互作结果显 效应因子的分泌，从而影响病茵在非寄主上的HR和在水稻上的致病性。这为进一步 分析水稻黄单胞茵T3SS的形成和分泌机制奠定了基础。