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- 2019-06-19 发布于中国
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实验五、细菌的革兰氏染色与细菌的芽孢染色 一、实验目的及内容 目的:1、复习革兰氏染色法的原理 2、初步掌握细菌的涂片方法及革兰氏染色法的步骤 3、了解细菌的芽孢染色的原理,掌握芽孢染色方法 内容:1、制作细菌的染色装片(复习简单染色的方法) 2、通过革兰氏染色,确定苏云金芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌、大肠杆菌为革兰氏阴性还是阳性细菌 3、细菌的芽孢染色 二、实验原理 1、革兰氏染色原理: 革兰氏染色法是将所有的细菌区分为革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。 细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物;乙醇能使它溶解,所以,染色的前二步结果是一样的,但在G+细胞中,由于细胞壁厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇时,因失水而网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫和碘的复合物(分子太大)牢牢留在壁内,使其保持紫色。反之,在G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖网层薄和交联度差,遇脱色剂乙醇后,以类脂为主的外膜迅速溶解,乙醇处理不但破坏了胞壁外膜,还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜,
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