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方法名称
水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定
（纸片快速法）
申请人
项目负责人员
制定原因
验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性
方法适用范围
适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。
方法来源
HJ 755-2015《水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》
仪器、试剂和环境的要求
1.仪器和设备
1.1高压蒸汽灭菌器
1.2培养箱
1.3冰箱
1.4 采样瓶
1.5 试管
1.6 水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片
2.试剂：2.1硫代硫酸钠 2.2乙二胺四乙酸二钠
采样和测试过程中，所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。
方法描述
按MPN法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂（溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC）以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃或44.5℃）培养24h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲（TTF）。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
检测结果的判断
1.结果判读：
制片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。
纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。
纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。
纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。
纸片无变化，为阴性。
2.结果计算：
根据不同接种量的阳性纸片数量，查MPN表得到MPN值，按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：
C=100*M/Q
式中：
C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（MPN/L）
M—查MPN表得到的MPN值(MPN/100ml)
Q—实际水样最大接种量（ml）
100—为10*10ml，其中，10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L，10ml为MPN表中最大接种量。
3.结果表示：
测定结果保留二位有效数字，大于等于100时以科学计数法表示，结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。
附件说明
表1
运行说明
经验证该方法符合我实验室使用。
审批意见
技术经理：
日 期：
总经理：
日 期：
表1
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