综合实训4革兰阴性需氧和兼性需氧杆菌.ppt

特征 弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 假单胞菌属 氧化酶 + + + + 葡萄糖发酵 + + + - O/129敏感性 +/- - + - 肌醇产酸 - - + 甘露醇产酸 + + - 明胶液化 + + - +/- TCBS生长 + - - - 需要Na+ + - - - 不发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性。代表菌株为铜绿假单胞菌。 42℃ 生长 明胶 液化 　鞭 　毛 + + 单鞭毛···铜绿假单胞菌 - + 丛鞭毛···荧光假单胞菌 - - 丛鞭毛···恶臭假单胞菌 OF试验：O 氧化酶：+ 精氨酸水解：+ 葡萄糖酸氧化：+ 　　　　氮气：+ 医院环境及用品、临床标本 分离培养基 涂片检查 肉汤培养基 血琼脂平板 SS、麦康凯琼脂平板 挑选可疑菌落（37℃ 培养18－24h观察 有无色素产生，色素鉴别接种金氏　A、B培养基） 无色素菌株 42℃ + 绿脓素+ 绿脓菌荧光素 铜绿假单胞菌 假单胞菌鉴定程序 1、形态观察：G- 杆菌，多形性，有鞭毛、菌毛、荚膜，无芽孢,产荧光素和绿脓素 2、培养特性：专性需氧，4℃不生长42 ℃生长，在血平板上经35—37℃，18—24h培养可表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐,有金属光泽,有生姜样芳香气味,菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。 3、生化鉴定：氧化酶阳性，触酶阳性，O-F试验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶，还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，甲基红阴性、VP阴性、利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。 需做的实验： 革兰染色、O/F、氧化酶、触酶、IMVC、精氨酸双水解酶、硝酸盐还原实验 2 革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌 革兰阴性杆菌 O-F试验 F － o/－ 非发酵菌 氧化酶试验 + 弧菌科 肠杆菌科 革兰阴性菌初步分群 乳糖发酵试验 A肠杆菌科共同特性 1、相似的形态染色 中等大小，G –杆菌，无芽胞，多数有动力 2、简单的培养条件 3、活泼的生化反应 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌 肠道非致病菌 不发酵乳糖 发酵乳糖 1、形态观察（革兰染色） G –杆菌 2、菌落观察 （1）埃希菌在肠道 选择性培养基上发酵乳糖产酸，在SS和MAC平板上为红色或粉红色菌落 (2)志贺菌属：将本菌接种在SS和MAC平板上经35℃孵育18～24h。由于志贺菌不分解乳糖，宋内志贺菌某些菌株可迟缓发酵乳糖，故其在SS平板和MAC平板上形成无色透明的、中等大小的菌落。除宋内志贺菌菌落外均为光滑型菌落。 (3)沙门菌属：将本菌接种在SS、MAC平板上经35℃孵育18～24h。由于本菌不分解乳糖并产碱，故在SS和MAC平板上形成无色、半透明、光滑湿润、凸起的小菌落，产生H2S的菌落可在SS平板上形成中心带黑褐色的小菌落。 3、生化反应 4、血清学实验　 革兰阴性杆菌，有周身鞭毛。 发酵多种糖类，多数能发酵乳糖，产酸产气 IMViC试验为+ + - -，MIU:++-, KIA:AA+-不产H2S 大肠杆菌血清型以O：K：H 能分解葡萄糖，产酸不产气， 不分解乳糖,除宋内志贺菌 IMViC试验为-+ - -，MIU:---, KIA:KA--,不产H2S 是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌， 通称痢疾杆菌dysentery bacteria 无鞭毛，有菌毛 生化反应 形态 A2志贺菌 低于其他肠道杆菌，对酸敏感 对理化因素的抵抗力 血清学：根据生化反应特征和O抗原分为4群 肝脾-肿大 胆囊-肠道-排菌(2周）肾脏-尿-排菌（3周) A3伤寒、副伤寒的致病过程 伤寒沙门菌和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌 肠粘膜上皮细胞 肠系膜淋巴结 固有层淋巴结 进入血液 再次进入血液 第一次菌血症 发热,不适,全身疼痛 第二次菌血症（1周） 高热、外周白细胞下降、肝脾肿大、 表情冷漠、玫瑰疹、相对缓脉 肝脏 脾脏 胆囊 肾脏 骨髓 并发症肠穿孔肠出血 典型病例病程为3-4W 胸导管 细菌学诊断 标本： 胃肠炎取粪便呕吐物或可疑食物 肠热症在病程不同阶段采取不同标本； 发病1周取血；发病1-3周取骨髓液 发病2 周取粪便；发病3周取尿 微生物学检查 细菌学诊断 标本 肠热症 食物中毒 败血症 第1周取静脉血 可疑食物 血 第1-3周取骨髓液 呕吐物 第2周起取粪 粪 第3周起取尿 SS平板 生化反应 血清