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- 2019-06-23 发布于辽宁
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课题1 DNA的粗提取与鉴定 一.基础知识 (一)提取DNA的方法 1.提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2.提取DNA的基本思路 ①提取DNA,去除其他成分 ②利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异 (1)DNA的溶解性 DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀;或者让其他成分溶解,DNA析出。 3.DNA等大分子的理化性质 (2)DNA不溶于酒精溶液 DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。将DNA与蛋白质进一步分离。 (3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ① 蛋白酶:水解蛋白质,对DNA没有影响。 ② 高温:大多数蛋白质不能忍受60~80℃,而DNA在80℃以上才会变性。 ③ 洗涤剂:溶解细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 (二)DNA的鉴定 1.二苯胺法:沸水浴条件下,DNA遇二苯胺被染成蓝色。 2.紫外灯照射法:DNA的紫外吸收高峰在260nm处。 3.电泳法:此方法适合鉴定纯度较高的DNA。 二.实验设计 (一)实验材料的选取 从下列材料中选取2~3种 菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜; 鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞; 在液体培养基中培养的大肠杆菌 1. D
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